Malaria: applicazione di metodi molecolari per diagnosi e indagini epidemiologiche

Il mio lavoro di tesi si basa sulla messa a punto e l’applicazione di tecniche molecolari per la diagnosi di malaria, identificazione di specie, genotipizzazione di cloni e di marcatori associati a farmacoresistenza. I metodi molecolari utilizzati sono tecniche di estrazione di DNA da campioni ematici, PCR, nested PCR, Real Time-PCR, e sequenziamento Sanger delle regioni implicate nella resistenza ai farmaci di nostro interesse. Questi metodi sono applicati allo studio di un caso di recrudescenza di malaria verificatosi in Azienda Ospedaliera Universitaria Pisana ad ottobre-novembre 2020, con l’obiettivo di valutare il possibile fallimento terapeutico dovuto a resistenza al trattamento con diidroartemisinina-piperachina. My thesis work is based on the development and application of molecular techniques for the diagnosis of malaria, identification of species, genotyping of clones and markers associated with drug resistance. The molecular methods used are techniques of DNA extraction from blood samples, Nested PCR, Real Time-PCR and Sanger sequencing of the regions involved in drug resistance of our interest. These methods have been applied to the study of a case of resurgence of malaria that occurred in the Pisan University Hospital in October-November 2020, with the aim of evaluating the possible therapeutic failure due to resistance to treatment with dihydroartemisinic-piperaquine