PROCÉLULA – CENTRO DE PROCESSAMENTO DE CÉLULAS PROGENITORAS HEMATOPOIÉTICAS: EXPERIÊNCIA DE NOVE ANOS E SETE MESES NA CLÍNICA DE HEMOTERAPIA LTDA, NITERÓI RJ, BRASIL

Desde a sua implantação, o Procélula colabora para o crescente número de transplantes autólogos realizados no setor privado do Estado do RJ. Demonstraremos, a seguir, nossa experiência. Para a coleta das CPH, os pacientes foram mobilizados com diferentes protocolos. As aféreses foram iniciadas no primeiro dia em que estes pacientes apresentaram mais de 10 células CD34+/mm3 no sangue periférico. Foram colhidas, em média, 4 volemias por aférese para células mononucleares em Cobe Spectra ou Óptia. A quantificação de leucócitos foi realizada em contador automático ABX Micros ES60. Os produtos foram criopreservados usando solução composta de hidroxietilamido em concentração a 5,83%, albumina humana a 4% e Dimetilsulfóxido (DMSO) a 5% do volume final, divididos em frações de 60 a 115 mL, com concentração celular alvo de 2-3x108 leucócitos totais/mL. Estas frações foram acondicionadas em freezer - 80°C e mantidas à temperatura constante até a data do transplante. A viabilidade celular foi definida por microscopia óptica e exclusão por azul de trypan. Para quantificação de CPH utilizamos citometria de fluxo para células CD34+/CD45low, segundo metodologia definida pela ISHAGE, em citômetroFACScalibur (B&D). Realizamos ensaio clonogênico com sistema MACSMedia (MiltenyiBiotech) de cultura em metilcelulose com fatores recombinantes para crescimento de unidades formadoras de colônias de granulócitos e monócitos (UFC-GM) que foram observadas em microscopia óptica invertida 14 a 16 dias após a incubação a 37°C. De dezembro de 2011 a junho de 2021, foram atendidos 967 pacientes (542 mielomas, 389 linfomas e 36 outras doenças) com mediana de idade de 55 anos (17 pediátricos entre 0,6 a 14 anos; 950 adultos entre 15 a 74 anos), que realizaram 1055 mobilizações com G-CSF (53 associadas à quimioterapia, 314 ao Plerixafor e 13 à quimioterapia e Plerixafor; 994 com coleta e 61 falhas de mobilização sem coleta) e um total de 1.486 aféreses. A média de CPH circulantes antes da primeira aférese foi de 23 CD34+/mm3 (0-410), com média de 4,01 x 106 CD34+/Kg (0,11-50,5) colhidas por aférese. Os produtos congelados apresentaram concentração celular média de 2,60 x 108/mL (0,35-6,61) com recuperação de 116,41% no descongelamento (36,4-283,3). Apresentaram viabilidade celular >99% antes da criopreservação, e recuperaram em média 92,9% (68-99,8) da viabilidade e 80,4% (5,5-830,5) das UFC-GM no descongelamento. Foram realizados 2.972 ensaios funcionais, e a relação entre elas (CD34/UFC-GM) foi de 2,5 (0,7-88,9) na amostra fresca e 3,3 (0,7-91,1) na amostra descongelada. Foram realizados transplantes em 915 destes pacientes, com médias de 3,63 x 106 CD34+/kg (1,20-19,79) e 1,68 x 106 UFC-GM/kg (0,04-10,60) infundidas em cada paciente. O tempo para pega de granulócitos teve média de 10 (8-17) dias. Estes dados demonstram, com ampla amostragem, que a criopreservação mecânica em freezer - 80°C com baixa concentração de DMSO resulta em excelentes desfechos clínicos para o transplante autólogo de CPH. Palavras-chave: Células progenitoras hematopoiéticas (CPH); Criopreservação e Transplante Autólogo