Criopreservación de espermatozoides del epidídimo canino mediante congelación convencional o congelación ultrarrápida con crioprotector no permeable

Este estudio tuvo como objetivo evaluar la efectividad de dos métodos para la criopreservación de espermatozoides del epidídimo canino, uno por congelación convencional (CF) con reducción de los tiempos de equilibrio y enfriamiento, y el otro por congelación ultrarrápida (URF) con crioprotector no permeable. Se recuperaron sesenta epidídimos de treinta perros adultos orquiectomizados y las muestras de esperma se recuperaron mediante lavado retrógrado usando extensor TCG-EY (tris, ácido cítrico, glucosa + 20% de yema de huevo) y luego se conformaron 20 grupos. Cada grupo se dividió en 2 alícuotas y luego se criopreservó mediante métodos CF y URF respectivamente. El método CF mantuvo las muestras de la piscina enfriada durante 2 h (1h sin y 1h con glicerol al 5%) y luego se congelaron con vapores de nitrógeno líquido (LN2) durante 2 min. El método URF criopreservó las muestras del pool refrigerado utilizando TCG-EY + sacarosa 250 mM, equilibrándolas durante 30 min (5 ◦C) y sumergiendo gotas de 30 μL directamente en LN2. Los resultados mostraron que el método URF produjo un menor porcentaje de motilidades totales y progresivas y la integridad del acrosoma (P 0,05) entre ambos métodos de criopreservación. A diferencia del método URF, el ancho, el área y el perímetro de la cabeza del esperma se redujeron después del método CF (P 0.05) between both cryopreservation methods. Unlike the URF method, the width, area and perimeter of sperm head were reduced after the CF method (P < 0.05). In conclusion, despite the low motility achieved after the ultra-rapid freezing method, the similar values of kinetic, viability and head morphometric dimensions to those obtained after conventional freezing, suggest that ultra-rapid freezing with sucrose may be a useful alternative for the cryopreservation of canine epididymal sperm