Androgenresistenz aufgrund epigenetischer Veränderungen am Androgenrezeptorpromotor

Eine häufige Ursache für eine Störung der Geschlechtsentwicklung bei Individuen mit ei-nem 46, XY Karyotyp ist die durch einen Androgenrezeptordefekt hervorgerufene Andro-genresistenz (AIS). Das klinische Erscheinungsbild (Phänotyp) erstreckt sich von Individuen mit komplett weiblichen äußeren Genitale (CAIS) über Individuen mit ambivalentem äu-ßeren Genitale (PAIS) bis hin zu Individuen mit weitestgehend unauffällig männlichem, äußeren Genitale, bei welchen lediglich die Spermatogenese und/oder die pubertäre Viri-lisierung beeinträchtig ist (MAIS). Während in nahezu allen Individuen mit CAIS eine Mu-tation im Androgenrezeptogens für die Androgenrezeptordysfunktion verantwortlich ist, kann bei 50 bis 75 % der Individuen mit klinisch diagnostizierten, milderen Formen der Androgenresistenz keine Mutation im Androgenrezeptorgen nachgewiesen werden. Durch den an Genitalhautfibroblasten angewandten, funktionellen APOD-Assay kann die Androgenrezeptorfunktion unabhängig von einer Mutation beurteilt und dadurch eine Androgenresistenz diagnostiziert werden. Dies führte zur Entdeckung der mutationsnega-tiven AIS-Gruppe AIS Typ 2 (Hornig et al., 2016b). Ziel dieser Arbeit war zum einen, mittels Expressionsanalysen Genitalhautfibroblasten von Individuen mit AIS Typ 2 und reduzier-ter Androgenrezeptor-mRNA-Expression zu identifizieren. Zum anderen sollte der Methyl-ierungsgrad im Androgenrezeptorpromotor in Genitalhautfibroblasten von Individuen mit AIS Typ 2 und niedriger Androgenrezeptor-mRNA-Expression analysiert werden, um einen möglichen Zusammenhang zwischen DNA-Methylierung und Androgenrezeptor-mRNA-Expressionsreduktion zu überprüfen. Hierfür wurde die Androgenrezeptor-mRNA-Expression in Genitalhautfibroblasten aus Vorhaut- und Skrotalgewebe von männlichen Kontrollen und in Genitalhautfibroblasten aus Labia majora- (Labioskrotal)/Labia minora-Gewebe von AIS Individuen mittels qPCR relativ quantifiziert. Der Methylierungsgrad der CpG-Dinukleotide eines bestimmten Be-reichs der proximalen Androgenrezeptorpromotorregion wurde mittels Bisulfit-Pyrosequenzierung analysiert. Durch Korrelationsanalysen wurde anschließend ein Zu-sammenhang zwischen Androgenrezeptor-mRNA-Expression und CpG-Methylierungsgrad überprüft. In vier von neun Genitalhautfibroblasten aus Labia minora Gewebe (homolog zu Vorhaut-Gewebe) von Individuen mit AIS Typ 2 konnte eine im Vergleich zu männlichen Kontrollen niedrigere Androgenrezeptor-mRNA-Expression nachgewiesen werden. Jedoch variierte die Expression zwischen den Messungen teilweise deutlich, was am ehesten auf eine Stö-rung während der Zellkultivierung zurückzuführen war. Auch die Methylierungsanalysen ergaben widersprüchliche Ergebnisse, weswegen auf eine Korrelationsanalyse in Genital-haufibroblasten aus Vorhaut- bzw homologem Gewebe verzichtet wurde. In neun von fünfzehn Genitalhautfibroblasten aus Labia majora Gewebe (homolog zu Skrotalgewebe) von Individuen mit AIS Typ 2 konnte eine im Vergleich zu männlichen Kon-trollen niedrigere Androgenrezeptor-mRNA-Expression festgestellt werden. Weiterhin wurde durch Methylierungs- und Korrelationsanalysen ein inverser Zusammenhang zwi-schen Androgenrezeptor-mRNA-Expression und Methylierungsgrad an zwei spezifischen CpG-Dinukleotiden im proximalen Androgenrezeptorpromotorbereich identifiziert. Hornig et al. konnten in weiteren Experimenten den regulatorischen Einfluss dieser zwei CpG-Dinukleotide auf die Androgenrezeptor-mRNA-Expression bestätigen (Hornig et al., 2018). Die Ergebnisse dieser Arbeit liefern neue Erkenntnisse über einen epigenetischen Mecha-nismus, der zu einer Androgenresistenz führen kann, ohne, dass eine Mutation in der Androgenrezeptor-kodierenden Sequenz des Androgenrezeptorgens vorliegt. Vorstellbar ist, dass diese epigenetische Fehlregulation eine Bedeutung in der Pathogenese weiterer androgenabhängiger Krankheitsbilder hat