随着现代生物技术产业的迅速发展,蛋白质的大规模分离已显得越来越重要,但现有的层析介质由于孔道狭小难以进行蛋白质等生物大分子的快速分离。本实验室前期研制的超大孔聚苯乙烯 (PS) 微球有望满足蛋白质分离对介质孔道的要求,但是PS的非特异性吸附作用会导致蛋白质等生物大分子失活变性,限制了该类介质在生物大分子分离方面的应用。针对这个问题,本论文采用了两种亲水性高分子(聚乙烯醇和琼脂糖)对超大孔PS微球进行了修饰镀层,进而利用镀层衍生出一种DEAE弱阴离子交换介质,并对该介质在快速分离生物大分子色谱上的应用作了初步的探索。 利用人工合成亲水性高分子聚乙烯醇 (PVA) 镀层疏水材料可以有效降低疏水材料对蛋白质的非特异性吸附,关于物理吸附PVA改性PS微球的文献较多,在PS微球上化学偶联PVA还未见报道。本论文首先通过Friedel-Crafts反应在超大孔PS微球上成功引入活泼的氯乙酰基;然后在碱性条件下利用Williamson反应将不同分子量的PVA通过稳定的C-O-C键以侧面连接 (side-on) 方式偶联到超大孔PS微球上,并结合称重法和红外光谱定量法,建立了一种方便快捷地确定PVA偶联量的方法。实验结果表明,用PVA修饰PS微球既能够有效掩盖其疏水表面,又保持了PS微球的超大孔结构,改性后的PS微球亲水性大幅提高,对牛血清白蛋白 (BSA) 的非特异性吸附量从原来的89.55 mg/g干球下降到7.72 mg/g干球,但与商品化介质Sepharose 6 Fsat Flow (Sepharose 6FF) 相比还有一定差距(0.574mg/g干球)。 为进一步降低超大孔PS微球对蛋白的非特异性吸附,本文尝试使用天然多糖-琼脂糖对超大孔PS微球进行修饰。在琼脂糖的侧链...