Genotipagem do vírus do papiloma humano de alto risco como ferramenta útil em estudos epidemiológicos antes e após a vacinação para prevenção do câncer do colo de útero

Introduction: Persistent infection by some genotypes of the human papillomavirus (HPV) in women is a recognized risk factor for development of intraepithelial cervical neoplasia. Cervical cancer is the fourth cause of death in women in Brazil. Vaccination against HPV is an effective public health measure to prevent cervical cancer. Objective: To develop a molecular test specific for HPV-16, HPV- 18, HPV-31 e HPV-45 types, which together account for 85% of cases of cervical cancer.Methods: Detection of type-specific viral DNA by the technique of quantitative fluorescent polymerase chain multiplex reaction (QFPCR). Clinical samples of vaginal swabs were genotyped from 28 patients, undergoing screening for low and high-grade cervicovaginal lesions, and attending the Ambulatory of Gynecology of the Hospital Escola Álvaro Alvim.Results: A type-specific cervico-vaginal HPV multiplex assay was developed for the simultaneous detection of HPV-16, HPV-18, HPV- 31 e HPV-45.Fifteen (53.6%) samples were positives for at least one HPV high-risk type, HPV-16 being the most prevalent (50%); four samples tested positive for HPV-16 and HPV-31, indicating co-infection. Only one (3.6%) sample tested positive for both HPV- 16 and HPV-18. None of the samples tested positive for HPV-45 type.Conclusions: The multiplex assay developed is a sensitive and rapid test, useful in molecular epidemiology studies before and after vaccination against HPV.Introdução: A infecção persistente por determinados genótipos do vírus do papiloma humano (HPV) em mulheres é um reconhecido fator de risco para o desenvolvimento de neoplasia intra-epitelial cervical. O câncer cervical é a quarta causa de morte em mulheres no Brasil. A vacinação contra o HPV é uma medida efetiva de saúde pública para prevenção de câncer cervical. Objetivo: Desenvolver um teste molecular genótipo-específico para HPV-16, HPV-18, HPV- 31 e HPV-45, que em conjunto são responsáveis por 85% dos casos de câncer cervical. Métodos: Detecção de DNA viral genótipo-específico pela técnica da reação multiplex quantitativa por fluorescência em cadeia dapolimerase (QF-PCR). Foram genotipadas amostras clínicas de esfregaço vaginal de 28 pacientes atendidas no Ambulatório de Ginecologia do Hospital Escola Álvaro Alvim, incluídas pela triagem de lesões cérvico-vaginais de baixo ou de alto grau. Resultados: Foi desenvolvido um ensaio multiplex para a detecção simultânea dos genótipos HPV-16, HPV-18, HPV-31 e HPV-45. Quinze (53,6%) amostras foram positivas para pelo menos umenótipo de HPV de alto risco, sendo o HPV-16 o mais prevalente (50%); quatro (14,3%) amostras foram positivas para o HPV-16 e HPV-31, indicando co-infecção. Apenas uma (3,6%) amostra foi positiva para ambos os genótipos HPV-16 e HPV-18. Nenhuma amostra foi positiva para o genótipo HPV-45. Conclusões: O ensaio multiplex desenvolvido é um teste sensível e rápido, útil em estudos de epidemiologia antes e após a vacinação contra o HPV