Avaliação comparativa do uso crônico do alendronato de sódio e do ácido zoledrônico em sítios pós-exodontia na mandíbula de ratos

Alendronate sodium (ALN) and zoledronic acid (ZA) are bisphosphonates (BP) with wide clinical use, but are associated with bisphosphonate-induced jaw osteonecrosis (BRONJ). To avoid BRONJ, the suspension of BP prior to extraction is still an uncertain method, controversial and without well-defined clinical protocols. Animal models of chronic BP treatment involving ALN and associated with extraction are not standardized, do not use human-compatible doses and often do not use the same route of administration, as has been done in some animal models administered with ZA. Thus, a comparative study with models using both BP is important to analyze similarities and differences in post-extraction alveolar healing situations. The aim of this study is to compare clinical, radiographic, histopathological and immunohistochemical aspects of experimental models with chronic BP treatment in rats using ALN and ZA. For this, 48 male Wistar rats (180–200 g) were divided into different experimental groups (n=6). All animals administered ZA were submitted to the same experimental protocol with three weekly intravenous infusions of 0.2 mg/kg, followed by extraction and one additional post-extraction infusion. The animals treated with ALN received different weekly oral doses of the drug (2.5 mg/kg, 5.0 mg/kg or 7.5 mg/kg) and were subdivided into groups with continuous and discontinuous administration before the surgical procedure of dental extraction. The negative control group consisted of animals treated with saline (0.1 m /kg) weekly by gavage. After 70 days of protocol, the animals were euthanized, being performed leukocyte analysis, radiographic, histopathological, histomorphometric and immunohistochemical exams (TNF-α and TRAP) of the extraction sites. As a result, we found that the radiolucent appearance of the alveoli in the continuous ALN groups was more evident than in the saline group; however, a larger significant radiolucent area at the extraction site was observed only in the ZA group compared to all other groups (p=0.007). Smaller area of bone tissue filling the socket cavity after extraction was observed in the continuous ALN (7.5 mg/kg) and ZA groups compared to the other groups (p<0.001). Number of empty osteocyte lacunae was more significant in ZA group compared to all other groups, however, continuous ALN groups showed higher number of empty osteocyte lacunae in relation to saline control (p<0.001). Vacuolated osteoclasts were seen in greater numbers in continuous ALN groups (5.0 mg/kg and 7.5 mg/kg) compared to other ALN-treated and saline groups, however, the ZA group had a higher number of vacuolated osteoclasts among all other groups (p=0.004). All ALN groups exhibited a higher presence of mononuclear inflammatory cells than the saline group, however, the ZA group showed even larger and statistically different numbers than all other groups (p=0.018), especially in relation to polymorphonuclear inflammatory cells (p<0.001). Immunohistochemical analysis for TNF-α was significant in the groups treated with discontinuous ALN 7.5 mg/kg, continuous ALN at 2.5 mg/kg, 5.0 mg/kg, 7.5 mg/kg and in ZA than the control group. TRAP positive osteoclasts were significantly higher in the continuous ALN 5.0 mg/kg, 7.5 mg/kg and ZA groups (p<0.001) than the control group. In short, continuously administered ALN decreases post-extraction alveolar bone healing in rats, especially at high doses. Such effects also occurred when ZA was used, however to a greater degree and with associated necrosis. Discontinuation of ALN does not imply significant changes in alveolar healing.O alendronato de sódio (ALN) e o ácido zoledrônico (AZ) são bisfosfonatos (BF) com ampla utilização clínica, todavia estão associados à osteonecrose dos maxilares induzida por bisfosfonatos (OMB). Para se evitar a OMB, a suspensão dos BF prévia à exodontias ainda é um método incerto, controverso e sem protocolos clínicos bem definidos. Modelos em animais de tratamento crônico com BF envolvendo ALN e associados à exodontia não são padronizados, não utilizam doses compatíveis à humana e, muitas vezes, nem a mesma via de administração, como já vem sendo realizado em alguns modelos animais com administração de AZ. Dessa forma, um estudo comparativo com modelos utilizando os dois BF é importante para se analisar semelhanças e diferenças frente a situações de cicatrização alveolar pós-exodontia. O objetivo deste estudo constitui em comparar aspectos clínicos, radiográficos, histopatológicos e imunoistoquímicos de modelos experimentais com tratamento crônico por BF, em ratos, utilizando ALN e AZ. Para isso, 48 ratos Wistar machos (180–200 g) foram divididos em diferentes grupos experimentais (n=6). Todos os animais administrados com AZ foram submetidos ao mesmo protocolo experimental com três infusões intravenosas semanais de 0,2 mg/kg, seguido de exodontia e uma infusão adicional pós exodontia. Os animais tratados com ALN receberam diferentes doses orais semanais do fármaco (2,5 mg/kg, 5,0 mg/kg ou 7,5 mg/kg) e foram subdivididos em grupos com administração contínua e descontínua, antes do procedimento cirúrgico de exodontia. O grupo controle negativo foi composto por animais tratados com solução salina (0,1 ml/kg), semanalmente, por gavagem. Após os 70 dias de protocolo, os animais foram eutanasiados, sendo realizada análise leucocitária, exames radiográficos, histopatológicos, histomorfométricos e imunoistoquímicos (TNF-α e TRAP) nos sítios de exodontia. Como resultados, evidenciamos que a aparência radiolúcida dos alvéolos nos grupos ALN contínuos estavam mais evidentes que no grupo salina, contudo, maior área radiolúcida significativa no sítio da exodontia foi observada apenas no grupo AZ em relação a todos os outros grupos (p=0,007). Menor área de tecido ósseo preenchendo a cavidade do alvéolo pós exodontia foi observada no grupo ALN contínuo (7,5 mg/kg) e AZ em comparação aos outros grupos (p<0,001). Número de lacunas de osteócitos vazios foi mais significativo no grupo AZ em relação a todos os outros grupos, entretanto, os grupos ALN contínuos evidenciaram maior número de lacunas de osteócitos vazios em relação ao controle salina (p<0,001). Osteoclastos vacuolizados foram visualizados em maior quantidade nos grupos ALN contínuos (5,0 mg/kg e 7,5 mg/kg) em comparação aos outros tratados com ALN e grupo salina, contudo, o grupo AZ apresentou maior número de osteoclastos vacuolizados entre todos os outros grupos (p=0,004). Todos os grupos ALN exibiram maior presença de células inflamatórias mononucleares que o grupo salina, todavia, o grupo AZ apresentou números ainda maiores e diferentes estatisticamente que todos os outros grupos (p=0,018), principalmente em relação às células inflamatórias polimorfonucleares (p<0,001). A análise de células imunomarcadas para TNF-α foi significante nos grupos tratados com ALN 7,5 mg/kg descontínuo, ALN contínuo nas concentrações de 2,5 mg/kg, 5,0 mg/kg, 7,5 mg/kg e no grupo AZ em relação ao salina (p<0,001). Os osteoclastos TRAP positivos foram significativamente maiores nos grupos ALN contínuo 5,0 mg/kg, 7,5 mg/kg e AZ, em relação ao salina (p