Avaliação do potencial Biotecnológico de bactérias e fungos isolados de uma estação de tratamento de Industria Têxtil

Dissertação de mestrado apresentada ao Programa de Pós-Graduação em Biociências, do Instituto Latino-Americano de Ciências da Vida e da Natureza, da Universidade Federal da Integração Latino-Americana, como requisito parcial à obtenção do título de Mestre em Ciências. Orientador: Prof. Dr. Michel Rodrigo Zambrano Passarini.Submitted by Suzan Bernal (suzanfernandes1@hotmail.com) on 2020-03-28T23:25:26Z No. of bitstreams: 1 SUZAN PRADO FERNANDES BERNAL_dissertacao_divulgacao_embargo.pdf: 284864 bytes, checksum: fa4c16558d86b48611ea29a7cd1d5fe4 (MD5)Made available in DSpace on 2020-03-28T23:25:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 SUZAN PRADO FERNANDES BERNAL_dissertacao_divulgacao_embargo.pdf: 284864 bytes, checksum: fa4c16558d86b48611ea29a7cd1d5fe4 (MD5) Previous issue date: 2020Bolsa de demanda social fornecida pela UnilaOs micro organismos representam uma das fontes mais abundantes para obtenção de produtos naturais biologicamente ativos que podem ser aplicados nas mais diversas necessidades cotidianas. A alta flexibilidade, facilidade de cultivo e replicabilidade de bactérias e fungos são alguns dos fatores que tornam esses organismos imprescindíveis em diversos setores da indústria e também na busca por compostos medicinais que possam conter diferentes patologias. Os ambientes aquáticos são responsáveis por agregar uma alta variedade de comunidades microbianas e as indústrias que utilizam de recursos hídricos, quando presentes, tendem a influenciar diretamente no ciclo de vida desses organismos, especialmente quando há despejo de poluentes. A formação desse ambiente complexo favorece o crescimento e prevalência de linhagens microbianas mais adaptadas, capazes de produzir metabólitos secundários para sua sobrevivência. A indústria têxtil é uma grande representante da utilização de água para seus processamentos e normalmente tende a possuir efluentes tóxicos com alta concentração de corantes, metais pesados e temperatura elevada. Com esta perspectiva, o presente projeto buscou analisar 105 micro organismos, entre bactérias e fungos isolados de uma estação de tratamento de indústria têxtil quanto a sua capacidade de produção de enzimas para aplicações industriais como a celulase, enzimas com potencial aplicação na área médica como a lacase e as proteases (gelatinase e colagenase) e metabólitos com ação antimicrobiana. Os testes de triagem em placas foram realizados para produção das enzimas de interesse, celulase em meio com CMC, lacase em meio com guaiacol e protease em meio ágar leite. Os testes de atividade enzimática de celulase foram feitos com Azo CMcelulose, para lacase foi utilizado ABTS e para os testes de proteases foi utilizado Azo caseína, bem como ensaios do pefil proteico, zimografia e atividade genatinolítica e colagenolítica. Os testes de antimicrobianos foram realizados por técnicas de difusão em discos com extrato microbiano e a atividade mínima inibitória também foi testada. Os isolados de interesse biotecnológico foram caracterizados por métodos morfológicos e moleculares (Taxonomia Polifásica). Os resultados demonstraram atividades enzimáticas dos fungos e algumas bactérias, onde o isolado ITF10 Aspergillus sydowii apresentou 0,0275 U L 1 de atividade enzimática de lacase. A melhor produção de celulase foi 50,6927 U ml 1 pelo isolado ITF47 Aspergillus amoenus. A atividade mais alta de protease extracelular foi pela bactéria ITB47 Bacillus sp. (9,466 U/enz mg e intracelular 7,000 U/enz) pelo isolado ITF14 Penicillium sp. Foi observado a produção de uma enzima com atividade gelatinolítica do fungo ITF33 Sarocladium sp, a qual foi caracterizada com peso de 45 kDa MM. Para o mesmo fungo, a atividade colagenolítica foi demonstrada em 9,04 U / mg. No teste de MIC a menor concentração encontrada foi 0,03125mg (ITF30 Aspergillus sydowii), capaz de inibir o crescimento da E.coli e os isolados ITF13, ITF30 e ITF47 foram capazes de inibir todas as bactérias patogênicas testadas. Foram identificados 9 micro organismos por sequenciamento molecular e outros 17 por morfologia microscópica. A pesquisa de micro organismos recuperados de fontes diferenciadas, como de efluente da indústria têxtil, se mostrou promissora, tendo em vista a identificação de células produtoras de compostos de interesse com alta aplicabilidade na área industrial e médica