Avaliação das atividades antioxidante, gastroprotetora e antimicrobiana de extratos orgânicos das folhas de Avicennia schaueriana Stapf & Leechman

FACEPEAvicennia schaueriana, espécie endêmica da vegetação de manguezal, é bastante utilizada pelas comunidades tradicionais no tratamento de reumatismo, infecções, úlceras e cicatrização de feridas. Desta forma, o objetivo deste estudo foi avaliar o potencila antioxidante, gastroprotetor e propriedade antimicrobiana dos extratos orgânicos das folhas de A. schaueriana. Os extratos acetato de etila (As-AcEOt) e etanol (As-EtOH) das folhas de A. schaueriana foram preparados pelo método de maceração. O perfil fitoquímico foi analisado por cromatografia em camada delgada (CCD), também determinado os teores de fenóis totais, flavonoides e taninos totais. Foi realizado o fracionamento do extrato As-AcEOt por cromatografia líquida em coluna e o composto isolado foi identificado por espectroscopia de Ressonância Magnética Nuclear. Os extratos As-AcEOt e As-EtOH também foram analisados por cromatografia líquida de ultra-desempenho acoplada com matriz de diodos e espectrometria de massa (UPLC-DAD-QTOF-MS/MS). A atividade antioxidante foi analisada através de DPPH e ABTS. A propriedade antimicrobiana foi avaliada pelos ensaios de difusão em ágar com disco de papel e microdiluição em caldo. Foi realizada a toxicidade aguda, segundo a OECD (423). A atividade gastroprotetora foi analisada através do modelo de úlcera induzida por etanol para ambos os extratos, e verificado o potencial do As-EtOH através do modelo de úlcera induzida por AINEs, em seguida determinado os níveis de mieloperoxidase (MPO) e a histologia da mucosa gástrica dos animais submetidos ao modelo de úlcera induzida por etanol. Para elucidar os possíveis mecanismos de ação, investigou-se o papel do óxido nítrico, compostos sulfidrílicos e prostaglandinas. A CCD demonstrou a presença de terpenos, flavonoides e taninos no As-AcEOt; flavonoides e taninos no extrato As-EtOH. O extrato As-AcEOt apresentou maiores teores de flavonoides (44,59 mgER/g) enquanto que o As-EtOH apresentou maiores teores de compostos fenólicos (216,86 mg EAT/g) e taninos (199,50 mg EAT/g). O fracionamento cromatográfico resultou no isolamento do ácido gálico do extrato As-AcEOt. A análise por UPLC-DAD-QTOF-MS/MS mostrou a presença de ácidos fenólicos e flavonoides. Os extratos As-AcEOt e As-EtOH apresentaram relevante atividade antioxidante (CE50 de 42,25; 42,99 μg/mL) pelo método de DPPH e inibição de ABTS de 73,23 e 89,11%, respectivamente. Na avaliação da atividade antimicrobiana, os As-AcEOt e As-EtOH foram mais eficazes contra bactérias Gram-positivas e fungo. Na toxicidade aguda os extratos orgânicos não registraram mortes, sinais tóxicos ou alterações bioquímicas ou hematológicas. Na atividade gastroprotetora, ambos os extratos reduziram o índice de lesão ulcerativa, além de diminuir os níveis de MPO. A histopatologia mostrou a preservação das fossetas gástricas e do tecido muscular, como também diminuição de infiltrados de neutrófilos e aumento da produção de muco dos animais tratados com As- AcEOt e As-EtOH nas doses de 100 e 200 mg/kg, respectivamente. A administração prévia dos antagonistas de óxido nítrico e compostos sulfidrílicos suprimiu o efeito gastroprotetor do As-AcEOt e As-EtOH mostra atuar pelas vias de óxido nítrico e prostaglandinas. O presente estudo revelou que os extratos orgânicos de A. schaueriana possuem propriedades antioxidante, antimicrobiana e gastroprotetora, sugerindo estas atividades podem estar associadas à capacidade antioxidante dos compostos fenólicos presentes nestes extratos.Avicennia schaueriana, an endemic species of mangrove vegetation, is widely used by traditional communities in the treatment of rheumatism, infections, ulcers and wound healing. Thus, the objective of this study was to evaluate the antioxidant, gastroprotector and antimicrobial property of the organic extracts of the leaves of A. schaueriana. The extracts of ethyl acetate (As-AcEOt) and ethanol (As-EtOH) from the leaves of A. schaueriana were prepared by the maceration method. The phytochemical profile was analyzed by thin layer chromatography (TLC) and the determination of total phenols, flavonoids and total tannins. The As-AcEOt extract fractionation was performed by liquid chromatography on a column and Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy identified the isolated compound. The extracts As-AcEOt and As-EtOH were analyzed by liquid chromatography coupled with diode matrix and mass spectrometry (UPLC-DAD-QTOF-MS/MS). The antioxidant activity was analyzed through DPPH and ABTS. The antimicrobial property was evaluated by diffusion assays on paper disc agar and microdilution in broth. Acute toxicity was performed according to OECD (423). The gastroprotective activity was analyzed through the ethanol- induced ulcer model for both extracts, and the potential of As-EtOH was verified through the NSAID-induced ulcer model, followed by myeloperoxidase (MPO) levels and mucosal histology of the animals submitted to the ethanol induced ulcer model. In order to elucidate the possible mechanisms of action, we investigated the role of nitric oxide, sulfhydryl compounds and prostaglandins. The CCD demonstrated the presence of terpenes, flavonoids and tannins in As-AcEOt; flavonoids and tannins in the As-EtOH extract. As-AcEOt extracts presented higher levels of flavonoids (44.59 mg RE/g) and As-EtOH had higher phenolic compounds (216.86 mg TAE/g) and tannins (199.50 mg TAE/g). Chromatographic fractionation resulted in the isolation of gallic acid from the As-AcEOt extract. Analysis by UPLC-DAD-QTOF-MS/MS showed the presence of phenolic acids and flavonoids. The extracts As-AcEOt and As-EtOH presented a relevant antioxidant activity (EC50 of 42.25, 42.99 μg/mL) by the DPPH method and ABTS inhibition of 73.23 and 89.11%, respectively. In the evaluation of antimicrobial activity, As-AcEOt and As-EtOH were more effective against Gram-positive bacteria and fungus. In acute toxicity the organic extracts did not register deaths, toxic signs or biochemical or hematological alterations. In the gastroprotective activity, both extracts reduced the ulcerative lesion index, in addition to reducing MPO levels. Histopathology showed preservation of gastric pits and muscle tissue, as well as reduction of neutrophil infiltrates and increase of mucus production in animals treated with As-AcEOt and As-EtOH at doses of 100 and 200 mg/kg, respectively. Previous administration of nitric oxide antagonists and sulfhydryl compounds has suppressed the gastroprotective effect of As- AcEOt and As-EtOH, demonstrating to act via the nitric oxide and prostaglandin pathways. The present study revealed that the organic extracts of A. schaueriana possess antioxidant, antimicrobial and gastroprotective properties, suggesting that activities may be associated to the antioxidant capacity of the phenolic compounds present in these extracts