Atividade radioprotetora do GQ-16 em células mononucleares do sangue periférico

BEZERRA, Mariana Brayner Cavalcanti Freire, também é conhecida em citações bibliográficas por: CAVALCANTI, Mariana Brayner ou BRAYNER CAVALCANTI, MarianaFACEPEPacientes submetidos à radioterapia (RT) podem apresentar sinais típicos de um quadro inflamatório decorrente da interação da radiação ionizante (RI) com o tecido sadio circunvizinho ao tumor. A instalação desse quadro inflamatório provém de uma exacerbação da resposta imunológica resultando em reações adversas, cuja intensidade varia para cada indivíduo de acordo com sua radiossensibilidade, além de constituir um dos fatores limitantes da RT. Embora fundamental para a eficácia deste tipo de tratamento, ainda não há indicador clínico com aplicabilidade prática na mensuração do grau de radiossensibilidade individual. A análise de moléculas endógenas intrinsicamente associadas ao processo inflamatório, a exemplo de citocinas, poderia ser utilizada na avaliação da radiossensibilidade individual, ao mesmo tempo em que essas moléculas poderiam ser alvos terapêuticos na minimização de efeitos adversos de origem inflamatória. Por outro lado, o GQ-16, uma tiazolidinediona (TZD) com atividade agonista parcial sob os receptores PPARγ, surge como possível alternativa terapêutica para modulação da resposta inflamatória radioinduzida. Neste contexto, este trabalho teve como objetivo avaliar o uso potencial de citocinas como bioindicador de radiossensibilidade individual, bem como a atividade imunomoduladora do fármaco GQ-16. Para tanto, foram cultivadas células mononucleares do sangue periférico de indivíduos saudáveis, não irradiadas e irradiadas (raios-X e dose de 2 Gy) in vitro. O método MTT foi utilizado para os testes de citotoxicidade da dose de radiação e do GQ-16 nas concentrações de 50, 75 e 100 μM. O grupo controle e as amostras irradiadas apresentaram viabilidade de 100% tanto quando expostas à radiação, quanto ao GQ- 16 em todas as concentrações. Em seguida, procedeu-se novas culturas celulares com células não irradiadas e irradiadas, na presença e ausência do GQ-16 nas concentrações de 50 e 100 μM. Após a cultura, foram analisadas as concentrações das citocinas IL-17A, IFN-γ, TNF, IL-4 e IL-2, por citometria de fluxo. Observou-se uma elevada variabilidade interindividual nos níveis de citocinas e na resposta à irradiação. Por outro lado, os testes comparativos entre a eficácia radioprotetora do GQ-16 e da metilprednisolona indicam que ambos os fármacos inibem significativamente os níveis das citocinas IFN-γ, TNF, IL-17A e IL-2, porém não influenciaram os níveis de IL-4. Os resultados desta pesquisa motivam investigações futuras sobre a análise do perfil de citocinas como possível preditor de radiossensibilidade individual. A utilização, in vitro, do GQ-16, nas concentrações de 50 μM e 100 μM, apresentou ação imunomoduladora eficaz. No entanto, sugere-se testes adicionais comprobatórios de sua eficiência como mitigador de efeitos colaterais associados a tratamentos envolvendo radiações ionizantes.Patients undergoing radiation therapy (RT) may present typical signs of an inflammatory process as a result of the interaction of ionizing radiation (RI) with the healthy tissue adjacent to the tumor. The installation of inflammatory process is a result of an exacerbation of the immune response aiming at to early adverse reactions with intensity varying in accordance to individual radiosensitivity, being a limiting factor of RT. Although is fundamental for the effectiveness of treatments with ionizing radiation, there are still no practical clinical indicators for measuring the degree of individual radiosensitivity. Endogenous molecules that mediate the inflammatory process, such as the group of proteins called cytokine, would be useful biomarkers in the prediction of individual radiosensitivity as well as potential therapeutic targets in minimizing adverse effects of an inflammatory nature. On the other hand, GQ-16, a thiazolidinedione (TZD) with partial agonist activity under the PPARγ receptors, appears as a possible therapeutic alternative for the modulation of the inflamed radio-induced response. In this context, this work was designed to evaluate the potential use of cytokines as bioindicator of individual radiosensitivity as well as the immunomodulating activity of GQ-16. For this purpose, peripheral blood mononuclear cells were cultured from healthy, non-irradiated and irradiated individuals (X-rays and dose of 2 Gy) in vitro. The MTT method was used for the cytotoxicity tests of the radiation dose and GQ-16 at concentrations of 50, 75 and 100 μM. Both, control and irradiated groups, showed 100% viability, proving that GQ-16 is non-toxic to the cell at all concentrations tested. Hence, new cell cultures were assayed for cytokine concentrations of IL-17A, IFN-γ, TNF, IL-4 and IL-2 by flow cytometry. There was high interindividual (n =7) variability in cytokine levels and response to irradiation. Comparative tests between the radioprotective efficacy of GQ-16 and methylprednisolone reveal that both drugs significantly inhibited the concentration of the cytokines IFN-γ, TNF, IL-17A and IL-2, but did not influence the IL-4 levels. The results of this study motivate further investigation about the evaluation of cytokines profile as a possible predictor of individual radiosensitivity. The use, in vitro, of GQ-16 at concentrations of 50 μM and 100 μM presented effective immunomodulatory action. However, additional tests supporting its effectiveness as a mitigator of side effects associated with treatments involving ionizing radiation are suggested