Desenvolvimento e validação de método bioanalítico por LC-MS/MS para quantificação das polimixinas B E colistina (polimixina E) no medicamento injetável polomixina B adicionado ao meio de cultura e estudo preliminar da farmacocinética e farmacodinâmica da polimixina B através de modelo estático de time kill curves

FACEPEA descoberta dos antibióticos propiciou um grande avanço no combate às infecções. Entretanto, o uso indiscriminado e contínuo de antimicrobianos levam ao desenvolvimento de resistência bacteriana a vários desses compostos. As bactérias Gram-negativas Pseudomonas aeruginosa, Acinetobacter baumannii e Klebsiella pneumoniae apresentam mecanismos de resistência a diversas classes de antibióticos e são importantes patógenos causadores de infecções nosocomiais, particularmente em pacientes de Unidade de Terapia Intensiva (UTI). As polimixinas são antimicrobianos polipeptídicos, derivados do Bacillus sp descoberto na década de 1940. Somente as polimixinas B e E (Colistina) têm sido usadas na prática clínica. Como no momento não há perspectivas de novas drogas surgirem no mercado, tem sido retomado o interesse na polimixina B, antibiótico cujo uso foi suspenso devido relatos de nefrotoxicidade e neurotoxicidade reportados na década de 1960. O conhecimento da farmacocinética (PK) e farmacodinâmica (PD) da polimixina B é extremamente limitado, o qual foi obtido antes de 1970, e apresenta várias limitações metodológicas, portanto os resultados devem ser analisados com parcimônia. O conhecimento da correlação PK-PD da polimixina B é extremamente importante, e estudos que contribuam para esse conhecimento são urgentes a fim de definir o modo de administração associado à maior eficácia e à menor toxicidade, e potencial de resistência. Uma das ferramentas que podem ser utilizadas para o conhecimento dos padrões PK-PD da polimixina B são as Kill curves ou curvas de morte. Essa ferramenta consiste na quantificação, em diferentes intervalos de tempo, do número de micro-organismo viáveis em meio de cultura após exposição a diferentes concentrações do antibiótico, obtidas a partir da determinação da concentração inibitória mínima. As informações obtidas a partir das curvas de morte auxiliam na racionalização da terapia hospitalar de modo a aumentar as chances de sucesso terapêutico, bem como, minimizar o risco de surgimento de resistência dos microorganismos aos antibióticos. Entretanto, para se estabelecer uma correlação PK-PD se faz necessário um método analítico que quantifique com precisão e exatidão o fármaco durante os estudos in vitro. Desse modo, o objetivo geral do trabalho foi desenvolver e validar um método de quantificação por LC/MS-MS das polimixinas B e colistina (polimixina E) simples, rápido e seguro, capaz de auxiliar os estudos in vitro de Kill curves visando a complementação de informações para um melhor conhecimento acerca da farmacocinética e farmacodinâmica destes fármacos