Preparação, caracterização e atividade biológica de nanocápsulas furtivas e sítio específicas contendo ácido úsnico para o tratamento do câncer

FACEPEtratamento, a eficácia terapêutica ainda é limitada. O ácido úsnico (AU) é um dos mais bem conhecidos e estudados derivados liquênicos, trata-se de um metabólito secundário liquênico que apresenta diversas atividades biológicas, dentre elas a antitumoral. O presente estudo objetivou desenvolver, caracterizar e avaliar a atividade antitumoral de nanocápsulas de ácido úsnico furtivas e sítio-específicas contendo folato em sua superfície (NC-PEG-FOL/AU). As nanocápsulas foram desenvolvidas pelo método de deposição interfacial de polímero préformado. As formulações foram caracterizadas por tamanho de partícula, índice de polidispersão, carga de superfície e eficiência de encapsulação. A atividade antitumoral in vivo do AU foi avaliada em camundongos machos Swiss, onde os animais receberam doses diárias de 15 mg/kg/dia do fármaco em suspensão e encapsulado em NC-PEG-FOL por 7 dias. Os resultados demonstraram que o método de preparação permitiu a formação de nanocápsulas nanométricas (Ø = 157,4 ± 2,97 nm), homogêneas (PDI = 0,27), com carga negativa (ζ = -10.58 ± 0.6 mV) e com uma alta eficiência de encapsulação do fármaco (EE = 98,0 ± 0,28 %). Nos estudos de citotoxicidade, as NC-PEG-FOL/AU exibiram citotoxicidade relevante (IC50 = 2,13 ± 0,02) quando comparada ao fármaco livre (IC50 = 10,04 ± 0,04). Observações em microscopia de fluorescência revelaram que as nanocápsulas sítio-específicas foram capturadas pelas células de Sarcoma-180. A distribuição da fluorescência nas células variou com o tempo. Nos estudos in vivo a atividade antitumoral do AU foi confirmada com inibição do crescimento tumoral em 40%. No entanto, a encapsulação em nanocápsulas furtivas e sítio-específicas potencializou a ação do AU resultando em inibição da massa tumoral acima de 80%. As nanocápsulas folato-específicas contendo ácido úsnico foram desenvolvidas como uma nova alternativa de aplicação destes sistemas para liberação seletiva do AU em células cancerígenas que expressam o receptor do folato, potencializando a ação do fármaco, visando uma futura aplicação terapêutica.treatment, the therapeutic efficacy is still limited. The usnic acid (UA), one of the most well known and studied compounds of natural origin, is a secondary metabolite liquenic that presents several biological activities, such as antitumor. The goals of this study were to develop, characterize and evaluate the antitumor activity of usnic acid (UA) encapsulated into targeted nanocapsules (UA/FOL-PEG-NC) and develop a simple, rapid and specific analytical method for quantification of UA in rat plasma by high performance liquid chromatography efficiency. Nanocapsules were developed by interfacial deposition of preformed polymer method. Formulations were characterized by particle size, polydispersity index, surface charge and encapsulation efficiency. The in vivo antitumor activity of the UA was evaluated in male Swiss mice, where animals received daily doses of 15 mg / kg / day of the drug in suspension and encapsulated in FOL-PEG-NC for 7 days. Results showed that the method of preparation allowed the formation of nanometric nanocapsules (Ø = 157.4 ± 2.97 nm) in homogeneous dispersion (PDI = 0.27), negatively surface charged (ζ = -10.58 ± 0.6 mV) and high drug encapsulation efficiency (EE = 98.0 ± 0.28 %). Concerning the cytotoxicity study, UA/FOL-PEG-NC exhibited relevant activity on Sarcoma-180 cell (IC50 of 3.67 ± 0.08) compared to the free drug (IC50 = 11.35 ± 0.32). Fluorescence microscopy revealed the uptake of targeted nanocapsules by Sarcoma-180 cells. The antitumor activity of the UA was confirmed by inhibition of tumor growth by 40%. However, the encapsulation in targeted nanocapsules increased the UA action, resulting in an inhibition of tumor mass above 80%. The folate-specific nanocapsules containing usnic acid have been developed as a new alternative for application of these systems for selective release of the UA in cancer cells that expressing folate receptor, potentiating the action of the drug, seeking a future therapeutic application