Evaluation of the antimicrobial activity of temporary restorative materials: agar diffusion test, biofilm and root canal microorganism quantification submitted to in situ acid challenge

As restaurações temporárias são essenciais para a manutenção da assepsia após o tratamento dos canais. O objetivo deste estudo foi avaliar a atividade antimicrobiana dos materiais restauradores temporários por meio do teste de difusão em ágar, além da quantificação do biofilme formado sobre as restaurações e dos micro-organismos presentes no sistema de canais radiculares, após desafio ácido em meio bucal. Foram testados 4 materiais temporários: ionômero de vidro de alta viscosidade (CIV AV; Ketac Molar/ 3M), ionômero de vidro fotoativado (CIV foto; Riva Light Cure/SDI), óxido de zinco sem eugenol (OZ; Coltosol/Coltene) e óxido de zinco com eugenol (OZE; IRM/Dentsply). Para o estudo in vitro, foram confeccionados discos de cada material, além de discos de papel embebidos em clorexidina 0,12% (CHX controle positivo; Periogard, Colgate). Culturas bacterianas dos micro-organismos Streptococcus mutans (ATCC 25175), Enterococcus faecalis (ATCC 4083), Enterococcus faecalis (cepa clínica isolada do participante da pesquisa) e Candida albicans (ATCC 1023) foram cultivadas em caldo BHI. Quatro discos de cada material foram distribuídos nas placas de Petri com Muller Hinton ágar, em duplicata. Após 30 dias, foi mesurada a zona de inibição do material (mm) para cada micro-organismo. Para o estudo in situ, foram utilizadas 70 raízes de incisivos centrais inferiores humanos com 10 mm. Foi realizado o preparo biomecânico dos canais até o instrumento #40.02, esterilização em autoclave e obturação com AH Plus e cones de guta percha. Cinquenta e seis raízes foram divididas em 4 grupos experimentais e receberam um dos quatro materiais testados. Nas 14 raízes remanescentes, não se utilizou material sobre a obturação (controle negativo). Catorze participantes foram submetidos à moldagem das arcadas dentais e foram confeccionados dispositivos acrílicos palatinos com 5 nichos (4 raízes experimentais e 1 raiz controle). As raízes foram fixadas com cera e tela para favorecer o acúmulo de biofilme sobre as restaurações. Durante 28 dias, os participantes utilizaram o dispositivo e foram orientados a gotejar solução de sacarose 20%, 6x ao dia, sobre as amostras. Ao final do período, 11 participantes concluíram o experimento. As raízes foram removidas dos dispositivos e analisou-se: 1) a quantidade de biofilme formado sobre as raízes (mg); 2) a contagem total dos micro-organismos viáveis (UFC) e a prevalência dos estreptococcus do grupo mutans (EGM) e contagem de Enterococcus spp. (m-Enterococcus) presentes nos canais radiculares (UFC/mL). Os dados do teste de difusão em ágar apresentaram distribuição não-normal e foram analisados pelo teste de Kruskal-Wallis (=0,05). Verificou-se que, independentemente do micro-organismo, a maior zona de inibição foi encontrada nos discos embebidos com CHX (15,45 ± 5,76 mm), sem diferença significante do OZE (8,99 ± 7,29 mm). As menores zonas de inibição foram encontradas para CIV foto (2,21 ± 0,40 mm b), CIV AV (2,42 ± 0,63mm b) e OZ (2,49 ± 0,39mm), todos sem diferença significante do OZE. Na comparação isolada, todos os materiais apresentaram baixa atividade antimicrobiana contra cepas padrão de S. mutans e E. faecalis ATCC. Para a cepa clínica isolada de E. faecalis do paciente, o OZE apresentou maior atividade antimicrobiana que a CHX. Para C. albicans, o OZE apresentou resultados similares a CHX, e os demais foram inferiores e iguais entre si. No estudo in situ, os dados referentes ao biofilme apresentaram distribuição não-normal (Kruskall-Wallis e Dunn, p0,05) e foram analisados por Análise de Variância a dois critérios (material x terços) e teste de Tukey. Para a contagem geral, houve maior quantidade de micro-organismos nos terços cervical (2,44 ± 0,65 b) e médio (2,11 ± 0,71b) (p>0,05) e a menor foi encontrada no terço apical (1,52 ± 1,16 a) (p 0.05) and were analyzed by ANOVA at two criteria (material x thirds) and Tukey\'s test. For the general quantity, there were more microorganisms in the cervical (2.44 ± 0.65 b) and medium (2.11 ± 0.71 b) thirds (p> 0.05), and the lowest was found in the third apical (1.52 ± 1.16 a) (p <0.05). For the S. mutans, it was verified that the roots sealed with ZOE (1.06 ± 1.06 a) had smaller amount of microorganisms (p <0.05), similar to the GIC-light (1.65 ± 0.93 ab) and GIC HV (1.53 ± 0.85 ab). OZ provided a higher penetration of microorganisms in the canal (1.78 ± 0.92 b), without difference from GICs and control (1.86 ± 1.11 b). For E. faecalis, the ZOE (0.75 ± 0.70 a) had a lower quantity of microorganisms (p