Otimização da metodologia de análise da enzimas catalase e glutationa s-transferase para a glândula digestiva do mexilhão Perna perna

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias.O objetivo deste trabalho foi otimizar e avaliar protocolos para dosar a atividade da CATALASE (CAT) e GLUTATIONA - S-TRANSFERASE (GST) da glândula digestiva de Perna perna, de modo a auxiliar o monitoramento das áreas associadas aos cultivos de moluscos. O pH ótimo para CAT está entre 7,0 e 9,0 e a temperatura ótima entre 20 e 50oC. O Kmap da CAT é 106,29 mM. O pH e temperatura ótimos da GST estão entre 7,5 e 9,0 e 30 e 40oC, respectivamente. O Kmap da GSH é 0,76 mM (GSH) e para o CDNB 0,63 mM. O congelamento do extrato de glândula digestiva por até 29 dias a -20 e -186oC não afetou a atividade específica das duas enzimas. A exposição do mexilhão à tinta anti-incrustante resultou em uma menor atividade da CAT, porém nenhuma alteração na atividade da GST foi observada. O transplante dos organismos para locais contaminados resultou em um aumento da atividade da CAT e um pequeno acréscimo na atividade da GST. O protocolo de análise da CAT não sofreu nenhuma alteração comparado ao método utilizado previamente. Utilizando o protocolo padronizado para medir a atividade da GST, foram obtidos valores mais altos do que com o método original. Para comparação entre os resultados obtidos através dos dois métodos, foi calculado o fator de conversão de 2,42. Baseado nestes resultados pode-se concluir que a metodologia de análise CAT e GST é adequada e que as análises podem ser realizadas até um mês após o processamento das amostras sem perda da atividade específica. Este tipo de análise pode contribuir com programas de monitoramento da qualidade da água em regiões associadas aos cultivos de moluscos