Influência da grelina no processo cicatricial e estresse oxidativo nas anastomoses colônicas

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências Médicas, Florianópolis, 2017.Introdução: Os procedimentos cirúrgicos com anastomoses colorretais são largamente realizados na prática médica e indicados para doenças benignas e malignas. A fístula anastomótica é a complicação mais grave e apresenta maior taxa de morbimortalidade, aumento do tempo de internação e dos custos hospitalares e piores resultados oncológicos. Diversos fatores influem na cicatrização da anastomose e são relacionados às técnicas cirúrgicas, às condições clínicas dos pacientes e ao uso de fármacos no período peri-operatório. Recentemente substâncias que liberam fatores do crescimento tem demonstrado melhoria nos parâmetros cicatriciais em diversos tecidos, principalmente no trato gastrointestinal. A grelina é um hormônio orexígeno com potente ação sobre a liberação do hormônio do crescimento (GH) e que também age de maneira benéfica nos processos de crescimento e reparo celular. Atua sobre diversas reações a nível molecular, inclusive sobre o estresse oxidativo que é um dos fatores que influem no processo cicatricial. Recentemente, foi demonstrada melhoria em alguns parâmetros da cicatrização de anastomoses colônicas com administração exógena de grelina. Objetivos: Investigar o impacto da administração exógena de grelina na cicatrização de anastomoses colônicas em relação a parâmetros mecânicos, histológicos, bioquímicos e marcadores de estresse oxidativo. Método: Estudo analítico experimental do tipo corte transversal com intervenção em sessenta e quatro ratos Wistar machos. Os animais foram distribuídos randomicamente em 8 subgrupos que receberam administração intraperitoneal pós-operatória de grelina (23?g/Kg/dia) ou soro fisiológico, sendo que, o tecido anastomótico cicatricial foi avaliado no 3º, 7º e 14º dias de pós-operatório, respectivamente. A pressão de ruptura, os parâmetros histológicos da cicatrização, o teor de hidroxiprolina, os níveis de Catepsina B e marcadores de estresse oxidativo tecidual foram comparados entre os subgrupos. Resultados: Houve aumento estatisticamente significante nas médias de pressão de ruptura da anastomose no subgrupo grelina no 7º PO (P=0,035). Na avaliação histológica houve diferença significante no infiltrado neutrofílico (P=0,035) no 3º e 14º PO, também na apoptose (P=0,004), no tecido de granulação (P=0,011) e na inflamação peritoneal (P=0,014) no 14º PO. Houve aumento estatisticamente significativo da concentração de hidroxiprolina no tecido cicatricial do subgrupo grelina no 14º PO (P=0,043). A avaliação de catepsina B não apresentou diferenças significativas. Na comparação dos marcadores de estresse oxidativo houve diferenças nas concentrações teciduais de NO2- (P= 0,021) no 3º PO e na produção de EROs (P=0,012) no 14º PO. Conclusão: A administração de grelina no pós-operatório apresentou efeitos benéficos anti-inflamatórios e antioxidantes no 3º e 14º PO e aumentou a resistência da anastomose no 7º PO e a concentração de hidroxiprolina tecidual no 14º PO.Abstract : Introduction: Surgical procedures with colorectal anastomosis are widely performed in medical practice for benign and malignant diseases. Anastomotic leakage is the most deadly complication and presents a higher rate of morbidity and mortality, increased length of hospitalization and costs and worse oncological results. Several factors influence the anastomotic healing process and are associated with surgical techniques, patient s conditions and perioperative drugs administration. Recently, drugs that release growth factors have shown improvement in the healing parameters in several tissues, mainly in the gastrointestinal tract. Ghrelin is an orexigenic hormone with potent action on the growth hormone (GH) releasing and acts in a beneficial way in the processes of growth and tissue repair. It acts on several steps at the molecular level, including oxidative stress, which is one of the factors that influence the healing process. Improvement in some parameters of the healing of colonic anastomosis with exogenous administration of ghrelin has been demonstrated. Objectives: To investigate the impact of exogenous administration of ghrelin on the colonic anastomosis healing process, evaluating mechanical, histological, biochemical parameters and oxidative stress markers. Method: Experimental cross-sectional analytical study with intervention in sixty-four male Wistar rats. The animals were randomly assigned to 8 subgroups receiving postoperative intraperitoneal administration of ghrelin (23 µg / kg / day) or saline. The anastomotic tissue was evaluated on the 3rd, 7th and 14th postoperative days, respectively. The anastomotic bursting pressure, histological parameters, hydroxyproline content and tissue oxidative stress markers were compared among the subgroups. Results: There was a significant increase in the means of anastomotic bursting pressure in the ghrelin subgroup on the 7th postoperative day (P = 0.035). Histological evaluation presented a significant difference in the neutrophilic infiltrate (P = 0.035) at the 3rd and 14th days, and apoptosis (P = 0.004), granulation tissue (P = 0.011) and peritoneal inflammation (P = 0.014) at 14th postoperative days. There was a statistically significant increase in the hydroxyproline content in the ghrelin subgroup at 14th postoperative day (P=0,043). The cathepsin B expression did not has significant differences. In the comparison of the oxidative stress markers, there were significant differences in the NO2- levels (P = 0.021) in the 3rd and in ROS levels (P= 0,012) in the 14th postoperative days. Conclusion: The administration of ghrelin had beneficial anti-inflammatory and antioxidant effects in the 3rd and 14th and increased the resistance of the anastomosis in the 7th and the hydroxyproline tissue content in the 14th postoperative days