Atividade de Antimicrobianos sobre o crescimento de CIanobactérias e produção de Cianotoxinas

Exportado OPUSMade available in DSpace on 2019-08-14T19:09:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 disserta__o_fernanda_azevedo.pdf: 1318135 bytes, checksum: 68d8adbe1d734f7c36db325f80e89abf (MD5) Previous issue date: 4A contaminação do ambiente por medicamentos é uma preocupação crescente, principalmente se tratando de antimicrobianos e biocidas. Esses tipos de substâncias afetam diretamente a biota local devido a sua natureza terapêutica, e esperada estabilidade em meio orgânico. Dentre os mais intensamente utilizados, em meio hospitalar, doméstico e veterinário, temos o ciprofloxacino, antimicrobiano da classe das quinolonas, muito encontrado no meio aquático, e a clorexidina, biocida da classe das biguanidas, amplamente utilizado no meio hospitalar e odontológico. Dos microrganismos mais afetados pela presença dessas substâncias antimicrobianas, as cianobactérias são consideradas uma das mais sensíveis, além de serem as mais suscetíveis, por estarem distribuídas por todo o ambiente, dominando a produção bentônica e planctônica de diversos habitats. As cianobactérias conseguem se proliferar em ambientes fortemente impactados e, considerando o aquecimento global, podem ocorrer as florações. Esse fenômeno tem se tornado comum nas águas superficiais pelo mundo, e é preocupante devido à maior produção e liberação de metabólitos secundários pelas cianobactérias, dentre esses as cianotoxinas. Elas podem ser hepatotóxicas, neurotóxicas ou citotóxicas, sendo relatados diversos acidentes de envenenamento por animais e até mesmo pelo homem, em contato com corpos dágua contaminados. Objetivos: definir a EC50 de duas linhagens de cianobactérias do gênero Microcystis sob efeito de ciprofloxacino e de clorexidina. Analisar a produção e liberação de cianotoxinas produzidas por quatro linhagens de cianobactérias do gênero Microcystis, sob efeito de determinada concentração de ciprofloxacino e de clorexidina. Métodos: teste de inibição de crescimento (Protocolo OECD 201), utilizando a cepa de Microcystis aeruginosa e Microcystis panniformis, individualmente, e o antimicrobiano ciprofloxacino e o biocida clorexidina, individualmente. Foram realizadas curvas de crescimento e a partir desses valores calculado a concentração de substância que inibe 50% do crescimento das células, em cultivo em laboratório. Posteriormente, quatro linhagens diferentes de cianobactérias do gênero Microcystis foram colocadas em contato com concentrações determinadas de ciprofloxacino e clorexidina, concentrações próximas da EC50 definida no experimento anterior, e após 96 horas foi extraída a microcistina intracelular e extracelular, sendo quantificadas por método imunoenzimático. Resultados: no primeiro experimento, duas das linhagens se mostraram mais sensíveis ao antimicrobiano do que ao biocida, sendo afetado também a produção de clorofila pelas células. No segundo experimento, três das quatro linhagens apresentaram aumento na concentração de microcistina, sob efeito de ciprofloxacino, e duas das quatro linhagens apresentaram aumento na concentração de microcistina, sob efeito da clorexidina. Conclusões: os resultados apontaram a gravidade do lançamento de efluentes contendo resíduos de medicamentos nos corpos dágua, oferecendo risco direto à biota aquática e indireto à população humana, com a liberação de metabólitos secundários nocivos pelas cianobactérias.Contamination of the environment by drugs is a growing concern, especially when it comes to antimicrobials and biocides. These types of substances directly affect the local biota because of its therapeutic nature, and expected stability in organic medium. Among the most heavily used in hospital, household and veterinary means we have ciprofloxacin, a quinolone antimicrobial class, very found in the aquatic environment, and chlorhexidine, biocide of the biguanide class, widely used in hospital and dental environment. Among the micro-organisms most affected by the presence of these harmful substances, cyanobacteria are considered one of the most sensitive, and are the most susceptible because they are distributed throughout the environment, dominating the benthic and planktonic production of various habitats. Cyanobacteria can proliferate in strongly impacted environments and, considering global warming may occur blooms. This phenomenon has become common in surface waters throughout the world, and is worrying due to increased production and release of secondary metabolites by cyanobacteria, among these the cyanotoxins. They can be hepatotoxic, neurotoxic or cytotoxic, and reported several poisoning accidents by animals and even humans, contact with contaminated bodies of water. Objectives: To define the EC50 two cyanobacterial strains of the genus Microcystis under the effect of ciprofloxacin and chlorhexidine. To analyze the production and release of cyanotoxins by four cyanobacterial strains of Microcystis genus, under the influence of certain concentration of ciprofloxacin and chlorhexidine. Methods: Growth inhibition test (OECD 201 protocol), using strains of Microcystis aeruginosa and Microcystis panniformis individually and ciprofloxacin antimicrobial and biocidal chlorhexidine individually. Growth curves were performed and were calculated values of these substance concentration that inhibits 50% of cell growth in culture in the laboratory. Subsequently, four different cyanobacterial strains of Microcystis genus were placed in contact with concentrations of ciprofloxacin and chlorhexidine, near the EC50 set in the previous experiment, and after 96 hours was extracted intracellular and extracellular microcystin, being quantified by enzyme immunoassay. Results: In the first experiment, two of the strains were more sensitive to antimicrobial than the biocidal, also being affected the production of chlorophyll by the cells. In the second experiment, three of the four strains showed higher concentrations of microcystin under effect of ciprofloxacin, and two of the four strains showed higher concentrations of microcystin under effect of chlorhexidine. Conclusions: The results indicate the seriousness of the discharge of effluents containing drug residues in water bodies, providing direct risk to aquatic biota and indirect human population, with the release of harmful secondary metabolites by cyanobacteria