Isolamento e caracterização bioquímica e molecular de microrganismo associados à interação Langsdorffia hypogaea-hospedeira-rizosfera.

Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia. Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas, Pró-Reitoria de Pesquisa e Pós Graduação, Universidade Federal de Ouro Preto.Submitted by Oliveira Flávia (flavia@sisbin.ufop.br) on 2014-12-03T15:49:45Z No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO_IsolamentoCaracterizaçãoBioquímica.pdf: 3845090 bytes, checksum: 8d4e4ecdfd9122058804589b297cc9c2 (MD5)Approved for entry into archive by Gracilene Carvalho (gracilene@sisbin.ufop.br) on 2014-12-09T20:54:15Z (GMT) No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO_IsolamentoCaracterizaçãoBioquímica.pdf: 3845090 bytes, checksum: 8d4e4ecdfd9122058804589b297cc9c2 (MD5)Made available in DSpace on 2014-12-09T20:54:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO_IsolamentoCaracterizaçãoBioquímica.pdf: 3845090 bytes, checksum: 8d4e4ecdfd9122058804589b297cc9c2 (MD5) Previous issue date: 2013Populações microbianas relacionam-se diretamente com diferentes nichos encontrados no ambiente. O solo é um importante ecossistema onde raízes de plantas e microrganismos contidos nele competem ou se associam pela aquisição de nutrientes. Baseado na relação de complementaridade entre microrganismos e planta, Langsdorffia hypogaea foi adotada como planta modelo, uma vez que se trata de uma espécie holoparasita pouco estudada e, por isso, caracteriza-se como um modelo potencial para a descoberta de novos microrganismos de interesse biológico e biotecnológico. O estudo teve como objetivo central bioprospectar a microbiota desse modelo e suas possíveis interações com sua planta hospedeira e rizosfera correspondente. Para isso, foram utilizadas inicialmente técnicas microbiológicas de cultivo e isolamento, seguidas de técnicas moleculares de identificação dos isolados. Também foram realizadas técnicas bioquímicas que permitiram verificar a capacidade destas 81 bactérias isoladas em produzir íon amônio, ácido cianídrico, ácidoindolacético, sideróforos e capacidade de fixação de nitrogênio e solubilização de fosfato. Testes para verificação do potencial de degradação de amido, pectina, proteínas e celulose também foram incorporadas nas análises. Com exceção da solubilização de fosfato e do potencial de degradação de proteínas e celulase, todos os outros parâmetros apresentaram resultados positivos para alguns dos isolados. Foram encontradas bactérias dos gêneros Bacillus, Enterobacter, Lysinibacillus, Paenibacillus, Serratia, Klebsiella, Ewingella, Citrobacter, Pseudomonas, Viridibacillus, da ordem Actinomycetale e da família Enterobacteriaceae, além de bactérias similares a depositadas no banco de dados como “não cultivadas” e uma bactéria que não apresentou similaridade com nenhuma já depositada no banco de dados (possivelmente nova). Tais resultados auxiliam no melhor entendimento da interação entre microrganismos e plantas, que poderiam justificar em parte a sobrevivência destas espécies em ambiente com diversas peculiaridades. Finalmente, por estas análises, possíveis bactérias classificadas como potenciais promotores de crescimento parecem ser fundamentais para a manutenção das espécies vegetais. Isto abre um leque de possibilidades de seus usos, em especial como fator substituinte de agroquímicos.Microbial populations are relate directly to different niches found in the environment. Soil is important ecosystems where plant roots and microorganisms contained therein or associate compete for the acquisition of nutrients. Based on the complementary relationship between microorganisms and plant, Landsdorffia hypogaea was adopted as a model plant, since it is a holoparasita specie little studied, and therefore characterized a potential model for the discovery of new biologically and biotechnology relevant microorganisms. The study aimed central bioprospect the microbiota of this model and its possible interactions with its host plant and corresponding rhizosphere. For this, microbiological techniques were used initially growing and isolation, followed by molecular techniques for the identification of isolates. Were also performed biochemical techniques that allow to verify the ability of these 81 isolates to produce ammonium ion, hydrocyanic acid, indole acetic acid, siderophores, and the ability to fix nitrogen and phosphate solubilization. Tests to verify the potential for degradation of starch, pectin, cellulose and proteins were also incorporated in the analyzes. With the exception of phosphate solubilization and degradation potential of cellulase and proteins, all other parameters showed positive results for some of the isolates. We have found bacteria of genus Bacillus, Enterobacter, Lysinibacillus, Paenibacillus, Serratia, Klebsiella, Ewingella, Citrobacter, Pseudomonas, Viridibacillus, the order Actinomycetale, the family Enterobacteriaceae, similar bacteria deposited in the database as "uncultivated"and bacteria which did not show any similarity with already deposited in database (possibly new). These results help to better understand the interaction between microorganisms and plants, which could partly explain the survival of these species in an environment with several peculiarities. Finally, for these analyzes, possible bacteria classified as potential growth promoters seem to be fundamental to the maintenance of plant species. This opens a range of possibilities for its uses, especially as substituent factor of agrochemicals