Reprodução induzida e criopreservação do sêmen de papa-terra Menticirrhus Americanus (Perciformes: Sciaenidae)

Tese(doutorado)-Universidade Federal do Rio Grande, Programa de Pós-Graduação em Aqüicultura, Instituto de Oceanografia, 2011.Submitted by Cristiane Silva (cristiane_gomides@hotmail.com) on 2012-07-22T21:32:30Z No. of bitstreams: 1 tese cintianakayama-1 em pdf.pdf: 1382153 bytes, checksum: 4984a9c31021ad542ff91f640d116ce6 (MD5)Approved for entry into archive by Bruna Vieira(bruninha_vieira@ibest.com.br) on 2012-07-27T18:41:28Z (GMT) No. of bitstreams: 1 tese cintianakayama-1 em pdf.pdf: 1382153 bytes, checksum: 4984a9c31021ad542ff91f640d116ce6 (MD5)Made available in DSpace on 2012-07-27T18:41:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese cintianakayama-1 em pdf.pdf: 1382153 bytes, checksum: 4984a9c31021ad542ff91f640d116ce6 (MD5) Previous issue date: 2011O papa-terra Menticirrhus americanus é um Sciaenidae com ampla distribuição na costa oeste do Atlântico, da Argentina aos E.U.A. Frente a seu potencial para aquicultura os objetivos do presente estudo foram a reprodução em cativeiro e a criopreservação do sêmen de M. americanus. Para a indução a maturação final e produção de ovos o estudo testou a efetividade da gonadotropina coriônica humana (hCG), acompanhando por meio da histologia os efeitos no desenvolvimento e a maturação dos ovócitos. Nos machos foi testada a qualidade espermática após resfriamento e criopreservação do sêmen em dimetil sulfóxido (DMSO). O desenvolvimento dos ovócitos foi classificado em pré-vitelogênese, vitelogênese e de maturação. No papa-terra o início da vitelogênese é marcado pela formação de glóbulos lipídicos e alvéolos corticais na periferia do ovoplasma. A vitelogênese protéica é caracterizada pela formação de grânulos de vitelo e coalescência dos glóbulos de lipídios. A coalescência do vitelo formando uma massa única, concomitantemente a hidratação dos ovócitos marcam o final da maturação. Fêmeas induzidas (300 UI hCG.kg-1) apresentaram 60% de sucesso nas desovas, com período de latência de 38,1 ± 3,4h. Os ovos mediram 730 ± 0,06 μm de diâmetro, com taxas de fertilização e eclosão de 63,8 ± 14,5 e 43,3 ± 10,7%, respectivamente. A fecundidade relativa foi estimada entre 40.080 e 294.000 ovos.kg-1. Em dosagens de 300, 600 e 900 UI de hCG.kg-1 o sucesso nas desovas foi de 45, 60 e 41 %, respectivamente. As três dosagens induziram a maturação final dos ovócitos, mas o melhor desempenho reprodutivo foi em 600 UI hCG.kg-1 com maior taxa de fertilização (73%) e maior produção estimada de larvas (39.000/desova). O sêmen apresentou osmolalidade de 370 mOsm.kg-1, espermatócrito de 88%, pH 6,9 e densidade de 9,9 x 109 espermatozóides.mL-1. A motilidade espermática foi ativada a partir de 300 mOsm.kg-1. Os testes de motilidade, após refrigeração (5˚C) foram realizados em intervalos de 3 h e demonstraram que o sêmen extrusado mantém a qualidade por 15 h, porém se mantido no testículo este período é de 6 h. Nos testes de criopreservação, as concentrações de DMSO 5, 10 e 20% não prejudicaram a motilidade espermática, nem a integridade de membrana pós-descongelamento, indicando DMSO 5% para a criopreservação do sêmen. Em suma, os resultados deste estudo permitiram delinear protocolos eficientes para maturação final dos ovócitos e criopreservação do sêmen, comprovando, pela primeira vez, a possibilidade da reprodução de Menticirrhus americanus em cativeiro. Ao mesmo tempo, os dados aqui apresentados deverão servir como base inicial para estudos futuros necessários a otimização da produção de larvas desta espécie.The Menticirruhs americanus is a sciaenid widely distributed along the Atlantic west coast from Argentina to the USA. As potencial specie to aquculture the objectives of the present study were the reproduction in captivity and cryopreservation of M. americanus semen. To final oocyte maturation and egg production the study tested the human corionic gonadotropin (hCG) in different dosages, and its effects in final maturation with histological description of the oocytes development and events related. The spermatic quality test was used to evaluate the effectiveness for refrigerated storage and cryopreservation with dimethyl sulfoxide (DMSO). The oocytes development was classified as pre-vitellogenic, vitellogenic and in maturation. At the early lipid vitellogenesis is pronounced by lipid globules and cortical alveolus. Yolk vitellogenesis is characterized by appearance of yolk granule, lipid vesicles and yolk granules coalescence. The yolk coalescence became a unique yolk mass that resulting in hydration and at the end of the maturation. Females induced with hCG (300 IU .kg-1) presented spawning success in 60%, the latency period was 38.1 ± 3.4h. Eggs diameter was 730 ± 0.06 μm, fertilization and hatching rate were 63.8 ± 14.5% e 43.3 ± 10.7%, respectively. The relative fertility was estimated ranged from 40.080 to 294.000 eggs.kg-1 eggs.kg-1. The dosages 300, 600 and 900 IU hCG.kg-1 to the spawning success was 45, 60 and 41%, respectively. And all of these dosages were effectiveness in the final maturation, but the best reproductive performance, fertilization rate (73%) and larvae production (39,000/spawning), was found in 600 IU hCG.kg-1. Semen presented osmolality 370 mOsm.kg-1, spermatocrit 88%, pH 6.9 and density 9.9 x 109 spermatozoa.mL-1. Motility was activated from 300 mOsm.kg-1. The motility test after cold storage (5˚C), every 3 h, showed extrused semen retained motility for 15 and semen from testis for 6h. Semen cryopreserved with 5, 10 and 20% dimethyl sulphoxide (DMSO) post-thaw sustained the same spermatic quality and membrane integrity The results point to 5% DMSO to cryopreservation M. americanus semen. In conclusion, the results allowed to develop efficient protocols to induce of final maturation and semen cryopreservation, performing for the first time the viability of the M. americanus reproduction in captivity