Immunopathological effects in experimental murine infection with Candida parapsilosis and partial characterization of hemolytic factor

Candida parapsilosis é um importante patógeno associado a infecções sanguíneas mas estudos sobre virulência e patogenicidade são escassos. Considerando que estudo evidenciou alteração comportamental em camundongo infectado, avaliou-se efeito imunopatológico no decorrer de infecção sistêmica em camundongos, aliada a caracteriazação parcial de fator hemolítico de C. parapsilosis. Grupos de camundongo SWISS e BALB/c foram infectados por via endovenosa (1x108 leveduras/animal), sendo o primeiro por 56 dias e o segundo durante 7, 14, 28 e 56 dias, tendo como controle o PBS. Foram analisadas: alterações comportamentais determinando-se número de giros/5min, detecção de células de Purkinje por imunofluorescência (anti-calbindin), contagem de células Purkinje por histopatologia, análise de apoptose utilizando anti-ligante de Fas por imunohistoquímica, no cerebelo de camundongos infectados durante 56 dias. Determinou-se também antigenemia por CFU e ELISA CAPTURA, níveis de citocinas (INF-&#947;, IL- 4, IL-17 e IL-10), expressão e atividade de indoleamine 2,3 dioxigenase (IDO) no cerebelo de camundongos infectados durante 7, 14, 28 e 56 dias. No decorrer de infecção foi avaliada também respostas imune humoral (ELISA), celular (DTH) anti cell free antigen (CFA) de C. parapsilosis e citocinas circulantes (INF-&#947;, IL- 4, IL-17 e IL-10). Para a caracterização de fator hemolítico, foi avaliada a atividade lítica de eritrócitos de camundongos utilizando CFA na forma nativa e aquecida (56°C, 1 h) e as frações de CFA obtidas por gel filtração (Sephadex G-100/120) e por filtração em Amicon (100k e 50k). Os níveis de carboidratos totais, capacidade de ligação à ConA e de reatividade aos anticorpos específicos (anti-eritrocito autólogo sensibilizado com CFA) foram determinados em frações de gel filtração. Além disso, as frações foram analisadas por western blotting, investigada a capacidade de anticorpos neutralizarem a atividade hemolítica e foram determinados os níveis de IgG anti-fração hemolítica em camundongos infectados com C. parapsilosis. Os resultados demonstraram diminuição de células de Purkinje (p14>28 dias) (p 14> 28 days) or activity of IDO 14 (7,14 days) were resulted in the cerebellum of infected, in relation to control. Also higher levels of antibody IgG (p <0.05) or DTH(p <0.05) to CFA and serum INF-&#947; (7 and 14 days) (p <0.05), IL-10 (56 days) (p <0.05) and IL-17 (56 days) (p