Laktoosi-intoleranssitesti: reaaliaikaisen PCR-menetelmän käyttöönotto ja työohjeen laatiminen Metropolia Ammattikorkeakoulussa

Tässä opinnäytetyössä tehtiin tarvittavat toimenpiteet, jotta Metropolia Ammattikorkeakoulussa voitiin ottaa käyttöön uusi Applied Biosystems™ QuantStudio™ 3 Real-Time PCR System -laite Thermo Fisher Scientificilta, ja perustettiin laitteelle testi laktoosi-intoleranssiin liittyvän geenimuutoksen toteamiseen DNA-näytteestä sekä laadittiin testille työohje. Tavoitteena oli kehittää bioanalytiikan tutkinto-ohjelman molekyyligenetiikan opintojaksoa, jonka teoriaosuuteen reaaliaikainen PCR-menetelmä kuuluu. Näin bioanalytiikan opiskelijat saisivat käytännön kokemusta menetelmän käytöstä, ja mahdollisuuden selvittää/testata, onko itsellä laktoosi-intoleranssiin liittyvä geenimuutos. Tämän opinnäytetyön teoriaosuudessa perehdyttiin laktoosi-intoleranssiin ominaisuutena, reaaliaikaiseen polymeraasiketjureaktioon menetelmänä ja mitä tämän menetelmän käyttäminen edellyttää sekä genotyypitykseen reaaliaikaisen PCR-menetelmän sovelluksena. Teoriataustassa selvitettiin myös käyttöohjeen käytettävyyden suunnitteluperiaatteita. Tausta pohjautuu vahvasti tieteelliseen kirjallisuuteen, mutta myös esimerkiksi QuantStudio™ 3-laitteen valmistajan järjestämässä opastuksessa kerrottuihin tietoihin. Tuotoksena laadittiin laktoosi-intoleranssitestille työohje. Työohje sisältää lyhyen taustoituksen laktoosi-intoleranssin genotyypitykseen, työn suorittamiseen tarvittavat välineet ja reagenssit listamuodossa, työn eri vaiheet erillisiin osioihin jaettuna sekä havainnollistavia esimerkkikuvia. Työohjeen laatimisessa käytettiin teoriaosuudessa käsiteltyjä suunnitteluperiaatteita sekä käytännön kokemuksia. Työohjeen toimivuutta päästiin arvioimaan käytännössä, kun bioanalytiikan opiskelijat testasivat sitä molekyyligenetiikan opintojaksolla ja antoivat palautetta. Työohjeessa sovelletaan teoriataustassa esitettyjä suunnitteluperiaatteita. Testauksessa saatujen, bioanalyytikko-opiskelijoiden antamien, palautteiden perusteella tehtiin pieniä parannuksia työohjeeseen. Esimerkiksi sivunumerointi ja eri työvaihekokonaisuusnumerointi tehtiin palautteen perusteella