Influence of antioxidants in preculture of in vitro microcuttings on grapevine regeneration after cryopreservation

Vinova loza (Vitis vinifera L.) se širom svijeta smatra kao jedna od ekonomski najvažnijih kultura. Banke gena Vitis se tradicionalno čuvaju u poljskim kolekcijama, međutim takvo održavanje biljnih genetičkih resursa je rizično jer su izloženi štetnicima, bolestima i drugim opasnostima vezanim uz nepovoljne biotske i abiotske čimbenike. Krioprezervacija je metoda za sigurno i dugoročno isplativo čuvanje vinove loze. Uspostava banke gena korištenjem krioprezervacije je izuzetno važna za očuvanje genetske raznolikosti. Korištenje in vitro kulture za vegetativno razmnožavanje, nudi važnu alternativu konvencionalnim metodama razmnožavanja biljaka. Korištenjem specifičnih antioksidansa u odgovarajućim koncentracijama se mogu značajno smanjiti štete od reaktivnih spojeva kisika, a time i poboljšati učinkovitost krioprezervacije. Cilj ovog rada je bio utvrditi utjecaj antioksidansa u predkulturi mikroreznica na rast i regeneraciju vegetacijskih vršaka vinove loze nakon krioprezervacije. Sorte vinove loze koje su korištene u istraživanju su: 'Graševina', 'Plavac mali crni' i 'Pošip bijeli'. Kod sorte 'Graševina' je utvrđen veći postotak regeneracije biljaka na mediju s askorbinskom kiselinom u odnosu na biljke na mediju sa salicilnom kiselinom. Kod sorata 'Plavac mali crni' i 'Pošip bijeli' se najveći postotak regeneriranih biljaka razvio na mediju sa dodatkom glutationa, a najmanji na mediju sa dodatkom salicilne kiseline. Na sorti 'Graševina' je regeneracija biljaka iznosila 11,1 %. Postotak potjeralih eksplantata nakon smrzavanja PVS2 50' koje je provedeno na različitim genotipovima 'Plavca malog crnog' i 'Pošipa bijelog' je iznosio između 25,0 % i 50 %.Grapevine (Vitis vinifera L.) is considered one of the most economically important crops worldwide. Vitis gene bank are traditionally kept in the field collections, however such maintenance of plant genetic resources is insecure because they are exposed to pests, diseases and other hazards related to adverse biotic and abiotic factors. Cryopreservation is a method for safe and long-term cost-effective preservation of the grapevine. Establishing a gene bank using cryopreservation is extremely important for preserving genetic diversity. The use of in vitro culture for vegetative propagation, offers an important alternative to conventional methods of plant propagation. The use of specific antioxidants in appropriate concentrations can significantly reduce the damage from reactive oxygen species, and thus improve the efficiency of cryopreservation. The aim of this study was to determine the influence of antioxidants in the microculture preculture on the growth and regeneration of shoot tips after cryopreservation. The grape varieties used in the research are: 'Graševina', 'Plavac mali crni' and 'Pošip bijeli'. In the cultivar 'Graševina', a higher percentage of plant regeneration was found on the medium with ascorbic acid compared to the plants on the medium with salicylic acid. In the cultivars 'Plavac mali crni' and 'Pošip bijeli', the highest percentage of regenerated plants developed on the medium with the addition of glutathione, and the lowest on the medium with the addition of salicylic acid. On the cultivar 'Graševina', plant regeneration was 11,1 %. The percentage of proliferated after freezing plants (PVS2 50') performed on different genotypes of ‘Plavac mali crni’ and ‘Pošip bijeli’ was between 25,0 % and 50,0 %