Polimorfismos genéticos associados aos defeitos de desenvolvimento de esmalte

Orientadora: Profa. Dra. Juliana Feltrin de Souza CaparrozTese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Odontologia. Defesa : Curitiba, 16/07/2021Inclui referênciasÁrea de concentração: OdontopediatriaResumo: Os defeitos de desenvolvimento de esmalte (DDE) são resultados de alterações durante a amelogênese. Clinicamente, esses defeitos são classificados em opacidade demarcada, opacidade difusa e hipoplasia. Dentre os DDE, os mais prevalentes são a fluorose dentária (FD), hipomineralização de molares e incisivos (HMI) e hipomineralização de segundos molares decíduos (HSMD). A FD é caracterizada por opacidades difusas, as quais podem se apresentar em linhas isoladas ou confluentes. A HMI é um defeito do esmalte específico, que se caracteriza clinicamente por opacidades demarcadas de coloração variada, nos primeiros molares permanentes e frequentemente em incisivos permanentes, quando essa hipomineralização está presente em segundos molares decíduos, esse defeito é denominado HSMD. Estudos anteriores consideravam os fatores sistêmicos como fatores de risco para defeito de desenvolvimento do esmalte (DDE), mas não explicavam totalmente sua etiologia. Considerando que a amelogênese está sob influência de fatores genéticos, é possível que a variação genética possa contribuir para o aumento do risco dos DDE, assim os objetivos desse estudo foram: (1) avaliar em uma amostra de base populacional relação entre HSMD com polimorfismos genéticos no gene HIF-1 (regulador de hipóxia); (2) por meio de estudo de revisão sistemática, avaliar os polimorfismos genéticos associados aos DDEs como FD, HMI e HSMD. (1) Para investigar a relação entre polimorfismos no gene HIF-1 e fatores ambientais, relacionados à hipóxia, com HSMD foi realizado um estudo observacional transversal com 731 escolares de 8 anos selecionados aleatoriamente em Curitiba-PR. A prevalência de HSMD nesta população foi de 9,4%, representando 69 casos (HSMD) e 662 sem HSMD. Os fatores ambientais foram coletados por meio de questionário e o HSMD foi diagnosticado por examinadores calibrados utilizando o critério DDE index modificado da FDI. Dois polimorfismos genéticos (rs2301113 e rs2057482) no gene HIF-1 foram genotipados por reação em cadeia da polimerase em tempo real. As associações foram testadas por análise de regressão de Poisson (Razão de Prevalência ajustada - RPa; P <0,05). No modelo múltiplo, incluindo os polimorfismos genéticos e fatores ambientais, o uso materno de droga (RPa = 4,52; P <0,001; IC 95% = 2,38-8,53), presença de doenças maternas durante a gravidez (RPa = 1,97; P = 0,034; IC 95% = 1,05 a 3,71), e doenças respiratórias durante a infância (RPa = 2,66; P = 0,003; IC 95% = 1,41 a 5,03) aumentaram significativamente a prevalência de HSMD. Na presença de fatores ambientais, indivíduos portadores de pelo menos um alelo C em rs2057482 apresentaram menor prevalência de HSMD (RPa = 0,51; P = 0,048; IC 95% = 0,27 a 0,99). (2) Um estudo de revisão sistemática foi realizado afim de avaliar os polimorfismos genéticos associados aos DDE, sob registro PROSPERO (CRD42018115270). As buscas foram realizadas nas bases de dados PubMed, Scopus, Web of Science, LILACS, BBO e Biblioteca Cochrane, bem como na literatura cinzenta. Os estudos incluídos foram observacionais, transversais, caso-controle e coorte que avaliaram a associação entre DDE e polimorfismos genéticos. O risco de viés dos estudos foi avaliado por meio do critério de Newcastle-Ottawa. A busca inicial resultou em 1.076 estudos, desses foram incluídos 22 estudos nessa revisão. O risco de viés dos estudos variou de 4 a 8 pontos. A idade dos participantes incluídos variou de 1 a 38 anos e o número de participantes incluídos variou de 52 a 1065. Foram investigados 23 genes cujas proteínas estão relacionadas ao desenvolvimento do esmalte (AMBN, AMELX, AMTN, ENAM, FAM83H, MMP, TFIP, TUFT), crescimento e morfogênese craniofacial (DLX, IRF, BGLAP, BMP, COL, CTR, FGFR, OPG, RANK), resposta imune (IL, MBL, DEFB), e transcrição/recepção hormonal (ESR, GHR, PTH). Observou-se que a HMI e/ou HSMD esteve associada com 18 polimorfismos de genes responsáveis pelo desenvolvimento do esmalte, resposta imune e crescimento e morfogênese. Encontrou-se associação significante entre as diversas aparências clínicas da fluorose dentária com 7 polimorfismos de genes responsáveis pelo desenvolvimento do esmalte, desenvolvimento craniofacial e transcrição/ recepção hormonal. Conclui-se (1) com base no estudo observacional, que crianças com fatores sistêmicos relacionados à hipóxia apresentaram maior prevalência de HSMD. Polimorfismo no gene no gene HIF-1 foi significantemente associado a prevalência de HSMD, sendo os indivíduos com alelo C em rs2057482 tiveram menor prevalência de HSMD em condições de hipóxia. (2) Os estudos incluídos na revisão sistemática observaram que os DDE, como HMI, HSMD e FD, reportados como etiologia complexa, também estão significativamente associados a polimorfismos genéticos. Estudos prospectivos e em animais são necessários para evidenciar de forma aprofundada o papel dos fatores sistêmicos/ambientais e genéticos na etiologia complexa dos DDEs. Palavras-chaves: esmalte dentário; fluorose dentária; hipoplasia do esmalte dentário; desmineralização do dente; polimorfismo genético.Abstract: Developmental defect of enamel (DDE) are the result of changes during amelogenesis. Clinically, these defects are classified as: demarcated opacity, diffuse opacity and hypoplasia. Among the DDE, the most prevalent are dental fluorosis (DF), molar-incisor hypomineralization (MIH) and hypomineralization of primary second molar (HPSM). The DF is characterized by diffuse opacities, which can appear in isolated or confluent lines. MIH is a specific defect of enamel, which is clinically characterized by demarcated opacities of varying color, in the first permanent molars and often in permanent incisors, when this hypomineralization is present in primary second molars, this defect is called hypomineralization of primary second molars (HPSM). Previous studies considered systemic factors as risk factors for developmental defect of enamel (DDE), but did not fully explain their etiology. Considering that amelogenesis is under the influence of genetic factors, it is possible that genetic variation may contribute to the increased risk of DDE, thus the objectives of this study were: (1) to evaluate in a population-based sample the relationship between HPSM with genetic polymorphisms in the HIF-1 gene (hypoxia regulator), (2) systematically evaluate the genetic polymorphisms associated with DDE such as DF, MIH and HPSM. (1) To investigate whether polymorphisms in the HIF-1 gene and environmental factors, related to hypoxia, were associated with HPSM, an observational cross-sectional study was carried out with 731 schoolchildren aged 8 years randomly selected in Curitiba-PR. The prevalence of HPSM in this population was 9.4%, representing 69 cases (HPSM) and 662 controls. The environmental factors were collected through a questionnaire and calibrated examiners, using the modified DDE index by FDI, diagnosed the HPSM. Two genetic polymorphisms (rs2301113 and rs2057482) in the HIF-1 gene were genotyped by polymerase chain reaction in real time. Associations were tested by Poisson regression analysis (Prevalence Ratio adjusted - PRa; P <0.05). In the multiple model, including genetic polymorphisms and environmental factors, maternal use of illicit drugs (PRa = 4.52; P