Primjena alkalnog kometnog testa u istraživanju radioprotektivnih učinaka alkoholnog ekstrakta propolisa i kvercetina na miševima ozračenim gama-zračenjem

The aim of this study was to assess radioprotective effects of quercetin and the ethanolic extract of propolis (EEP) in CBA mice exposed to a single radiation dose 4 Gy (60Co). The mice were treated with 100 mg kg-1 quercetin or EEP a day for three consecutive days either before (pre-treatment) or after gamma-irradiation (therapy). Leukocyte count was determined in blood drawn from the tail vein, and DNA damage in leukocytes was assessed using the alkaline comet assay. Genotoxic effects of the test compunds were also evaluated in non-irradiated mice. The levels of radioprotection provided by both test compounds were compared with those established in mice that were given chemical radioprotector S-(2-Aminoethyl)isothiouronium bromide hydrobromide (AET). Mice that received pre-treatment were less sensitive to irradiation. Mice given the post-irradiation therapy showed a slight but not significant increase in total leukocyte count over irradiated negative control. Quercetin showed better protective properties than EEP in both pre-treatment and therapy, and activated a higher number of leukocytes in non-irradiated mice. The alkaline comet assay suggests that both natural compounds, especially when given as pre-treatment, protect against primary leukocyte DNA damage in mice. At tested concentrations, EEP and quercetin were not genotoxic to non-irradiated mice. AET, however, caused a slight but not significant increase in DNA damage. Although the results of this study show the radioprotective potential of the test compounds, further investigation is needed to clarify the underlying protection mechanisms.Na miševima soja CBA istraženi su radioprotektivni učinci alkoholnog ekstrakta propolisa (AEP) i flavonoida kvercetina primijenjenih u obliku predtretmana i terapije usporedo s izlaganjem gama-zračenju iz izvora 60Co, doze 4 Gy. Testirane tvari injicirane su miševima intraperitonealno u dozi od 100 mg kg-1 tijekom tri uzastopna dana. Nakon završetka pokusa u uzorcima krvi ozračenih miševa utvrđen je ukupni broj leukocita, a razina primarnih oštećenja u DNA izmjerena je primjenom alkalnog kometnog testa. Usporedo su istraženi i mogući genotoksični učinci testiranih tvari na neozračenim miševima. Razine radioprotekcije koju pružaju propolis i kvercetin uspoređene su sa sintetskim radioprotektorom AET-om (S-(2-aminoetil)izotiouronij bromid hidrobromid). Predtretman miševa bilo kojim oblikom radioprotektora pridonosi boljem odgovoru na zračenje. U miševa koji su primili radioprotektore u obliku terapije uočen je mali porast ukupnog broja leukocita u odnosu na ozračenu negativnu kontrolu. Kvercetin je pružio bolju zaštitu od zračenja nego AEP, i u predtretmanu i terapiji, a u neozračenih miševa potaknuo je oslobađanje većeg broja leukocita u odnosu na negativnu kontrolu. Rezultati istraživanja upućuju na to da propolis i njegove fl avonoidne sastavnice, osobito ako su primijenjene prije ozračivanja, mogu učinkovito zaštititi miševe od štetnih učinaka ionizirajućeg zračenja i smanjiti razinu primarnih oštećenja DNA u leukocitima. AEP i kvercetin u testiranim dozama nisu bili genotoksični, za razliku od AET-a koji je izazvao mali porast razine oštećenja DNA u leukocitima neozračenih miševa. Iako rezultati istraživanja upućuju na radioprotektivne učinke testiranih prirodnih spojeva, radi pojašnjenja pretpostavljenih mehanizama radioprotekcije potrebna su daljnja istraživanja