Semen cryopreservation of Amazonian catfish (Leiarius marmoratus) and stallion semen cooling

This study assessed the effects on sperm quality when Xanthan gum was added to stallion sperm in a cooling protocol and two cryoprotectants added to fish semen (Leiarius marmoratus) in two freezing protocols. The stallion semen (n=20) samples were stored cooled (5°C) using different concentrations of xanthan gum added to the standard extender (Kenney): control (no xanthan added), 0.01%, 0.12%, and 0.25%). Sperm parameters, such as motility, mitochondrial function, membrane integrity, acrosome integrity, and DNA integrity, were analyzed after 0, 24, 48, and 72 hours of storage. In the fish species L. marmoratus (n=8), semen samples were diluted in dimethyl sulfoxide (DMSO) at 5, 10, 15, and 20% concentrations and in trehalose at 50, 100, 150, and 200 mM concentrations. Samples were diluted (1:9, v/v), frozen in nitrogen vapor vessel (dry shipper), and stored in liquid nitrogen vessel at -196°C. The semen parameters sperm motility (CASA), motility duration, membrane integrity, DNA, and mitochondrial function were assessed post-thawing. Regarding the cooling protocol, the sperm motility was decreased during cooling process in the group 0.25% xanthan gum when compared to the control group (60.5% and 44.73%, respectively). The cryopreservation protocol using trehalose at 50 mM obtained 15.6 and 9.5 % of total and progressive motilities, respectively, being these results inferior to the treatments containing trehalose at 150 mM (22.9 and 17.7%, respectively) and 200 mM (31.4 and 26.3%, respectively) (P0.05). Therefore, in these experimental conditions the addition of xanthan gum to stallion sperm is not harmful to the sperm cell structure, despite of reducing total motility. DMSO was not efficient to preserve semen quality and the addition of trehalose at high concentrations exhibited superior results when compared to other treatments in in vitro motility parameters in L. marmoratus.Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPESEste estudo avaliou os efeitos da adição de goma xantana no diluente de resfriamento de sêmen equino e de dois protocolos distintos de criopreservação de sêmen de peixes Leiarius marmoratus, sobre parâmetros de qualidade espermática analisados in vitro. No experimento realizado nas amostras de sêmen da espécie equina, (n=20) armazenadas sob refrigeração (5°C) os grupos experimentais foram: controle (Kenney) e controle adicionado de goma xantana (0,01%, 0,12% e 0,25%). Parâmetros espermáticos, como motilidade, funcionalidade mitocondrial e integridade da membrana, acrossoma e DNA foram avaliados após 0h, 24h, 48h e 72h de armazenamento. Nos experimentos realizados nas amostras de sêmen dos peixes da espécie L. marmoratus (n=8) foram utilizados dimetilsulfóxido (DMSO): 5, 10, 15 e 20% e trealose: 50, 100, 150, 200mM. As amostras foram diluídas (1:9 v/v), congeladas em recipiente de vapor de nitrogênio (dryshipper), e armazenadas em nitrogênio líquido a -196°C. Após o descongelamento foram analisados parâmetros de motilidade espermática (CASA), tempo de motilidade, integridade de membrana, DNA e funcionalidade mitocôndria. No experimento realizado nas amostras de sêmen da espécie equina a motilidade espermática diminuiu ao longo do período de resfriamento no grupo que recebeu 0,25% de goma xantana em comparação com o grupo controle (60.5 e 44.73% respectivamente). Nos experimentos realizados nas amostras de sêmen dos peixes da espécie L. marmoratus, com o uso de protocolo de criopreservação baseado na utilização de diferentes concentrações de DMSO, quanto as motilidades totais e progressivas, linha curva de velocidade (VCL), linha reta de velocidade (VSL) e linearidade, o tratamento contendo 5% de DMSO apresentou resultados inferiores aos tratamentos contendo 15 e 20% de DMSO (P0,05). Já no protocolo baseado no uso da trealose, motilidades totais e progressivas superiores foram observadas nos grupos que receberam as maiores concentrações 150mM (22,9 e 17,7%, respectivamente) e 200mM (31,4 e 26,3%, respectivamente) (P