Research of Pathogen Detection and Probiotics Application in Kaohsiung Linyuan Aquaculture Ponds.

指導教授 周裕然因過度捕撈海洋生物資源已使漁獲量逐年減少，水產養殖生物須透過人工孕育繁殖、養殖的方式來因應，供給人類對於動物性蛋白日益增長的需求，且臺灣四面環海擁有得天獨厚的養殖環境，適合發展水產養殖產業。 由於高雄林園地區沿海養殖許多經濟價值高的水產動物及具規模的魚苗繁殖場，本研究為能瞭解林園地區水產動物養成階段困擾漁民之魚病問題，於2016年12月6日至2017年3月6日間針對14口養殖場水體(3場龍膽石斑、1場鰻魚、10場金目鱸魚)進行水質檢測、微生物分離培養及菌種分子生物鑑定，並參考國內外期刊論文曾發表過對水產動物及人類造成危害的致病菌，選擇出9種較為常見的危害性菌種(Vibrio parahaemolyticus、Vibrio vulnificus、Vibrio cholera、Vibrio alginolyticus、Vibrio harveyi、Aeromonas hydrophila、Photobacterium damselae、Streptococcus iniae、Salmonella spp.)進行之專一性PCR引子收集與特定基因片段夾取，終以定序結果驗証。此外本研究利用多種市售益生菌對養殖場分離出之致病菌進行抑菌測試，觀察其於培養基上菌落消長情形。亦對7項水質項目分析(NH3-N、NO2-N、NO3-N、ORP、pH、鹽度、溫度)，分析比較不同養殖池中水質對菌相生長之相關性。 水質檢測結果顯示本研究中鰻魚養殖場的pH值較龍膽石斑及金目鱸魚場高出0.69-1.45間，而石斑及鱸魚場的pH則在7.41至8.17之間。鱸魚場NH3-N的部分分別有3場濃度較高，且在這3場均發現有共同的病原菌P. damselae，同樣的在鱸魚場分別於淡水及鹽度25 0/00的養殖環境中皆有檢出的V. alginolyticus。 研究結果顯示在本研究中林園區養殖環境水中除存在V. cholerae、V. alginolyticus、P. damselae外，亦發現3種有害菌種Pseudomonas aeruginosa、Citrobacter freundii及Stenotrophomonas maltophilia，依文獻可能破壞魚類肝臟細胞及造成人類傷口感染、腹瀉、敗血症等危害。此外抑菌測試的結果發現Stenotrophomonas spp.在Mac conkey培養基上可以抑制V. alginolyticus菌落的擴散；在LB培養基上則可抑制C. freundii及S. maltophilia菌落的擴散，Bacillus spp.則可抑制P. damselae菌落的擴散；在Nutrient agar培養基中Pseudomonas spp.也可抑制C. freundii菌落擴散。藉由本研究瞭解養殖區域水質現況，提供水產養殖管理參考，也可以作為將來養殖環境評估參考依據，期待能減少藥物、生物性危害造成之損失