Toksisitas senyawa steroid hasil pemisahan metode KLTP fraksi n-butanol mikroalga Chlorella sp.

ABSTRAK: Penelitian senyawa steroid dari mikroalga Chlorella sp. mengenai tingkat toksisnya terus dilakukan. Uji toksisitas terhadap udang Artemia salina Leach memberikan nilai LC50 dari senyawa uji yang menunjukkan tingkat toksisnya. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui tingkat toksisitas dari fraksi n-butanol dan isolat senyawa steroid hasil KLTP mikroalga Chlorella sp.. Isolasi senyawa steroid dari Chlorella sp. dilakukan melalui ektraksi maserasi dengan pelarut metanol p.a; yang kemudian dihidrolisis dengan HCl 2 N dan dipartisi menggunakan pelarut n-butanol. Adanya senyawa steroid pada fraksi n-butanol ditandai dengan munculnya cincin hijau kebiruan oleh penambahan reagen LB. Pemisahan senyawa steroid hasil partisi, dilakukan menggunakan metode KLTP dengan rasio eluen n-heksana:etil asetat (3,75:1,25). Senyawa steroid hasil pemisahan kemudian diuji toksisitas terhadap udang Artemia salina Leach dan diidentifikasi dengan spektrofotometer FTIR. Hasil pemisahan KLTP didapat dugaan senyawa steroid dengan warna spot hijau kebiruan yang muncul pada Rf 0,83. Berdasarkan hasil uji toksisitas, didapatkan nilai LC50 dari fraksi n-butanol sebesar 6,84 ppm dan nilai LC50 isolat senyawa steroid hasil KLTP sebesar 6,35 ppm. Identifikasi menggunakan FTIR pada fraksi n-butanol menunjukkan adanya serapan gugus -OH, -CH, -C=C, C-H tekuk, dan C-O alkohol sekunder. Sedangkan pada isolat senyawa hasil KLTP menunjukkan serapan gugus -OH, -CH, -C=C, C-H tekuk, C-O-C, C-H alkena, geminal dimetil -CH(CH3)2, alkohol primer, dan alkohol sekunder. ABSTRACT: Research on steroid compounds from the microalgae Chlorella sp. regarding the level of toxicity continues. The toxicity test for Artemia salina Leach shrimp gave the LC50 value of the test compound which indicated its toxicity. This study aims to determine the level of toxicity of the n-butanol fraction and steroid compound isolates from the TLC microalgae Chlorella sp.. Isolation of steroid compounds from Chlorella sp. carried out by maceration extraction with methanol p.a. solvent; which was then hydrolyzed with 2 N HCl and partitioned using n-butanol as a solvent. The presence of steroid compounds in the n-butanol fraction is indicated by the appearance of a bluish-green ring by the addition of the LB reagent. Separation of partitioned steroid compounds was carried out using the PTLC method with the eluent ratio of n-hexane: ethyl acetate (3.75: 1.25). The separated steroid compounds were then tested for their toxicity against Artemia salina Leach shrimp and identified by the FTIR spectrophotometer. The results of PTLC separation obtained a single steroid isolate with a bluish-green spot color that appeared at Rf 0.83. Based on the results of the toxicity test, the LC50 value of the n-butanol fraction was 6.84 ppm and the LC50 value of the steroid compound isolate from TLC was 6.35 ppm. Identification using FTIR on the n-butanol fraction showed the presence of -OH, -CH, -C=C, C-H bending, and C-O secondary alcohol. While the TLC results showed absorption, such as -OH, -CH, -C=C, C-H bending, C-O-C, C-H alkene, geminal dimethyl -CH (CH3)2, primary alcohol, and secondary alcohols. مستخلص البحث: بحث عن مركبات الستيرويد من الطحالب الدقيقة شلوريلا سف. (Chlorella sp.)فيما يتعلق بمستوى السمية يستمر. أعطى اختبار السمية لجمبري ارتيميا سالينا ليتش قيمة LC50 لمركب الاختبار مما يدل على سميته. تهدف هذه الدراسة إلى تحديد مستوى السمية لجزء ن-بوتانول و عزلات مركب الستيرويد من كروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة التحضيرية (KLTP) شلوريلا سف. (Chlorella sp.). عزل مركبات الستيرويد من شلوريلا سف. (Chlorella sp.)تتم عن طريق الاستخلاص بالنقع باستخدام مذيب الميثانول p.a ؛ و التي تم تحللها بعد ذلك مع HCl 2 N و تقسيمها باستخدام ن-بوتانول كمذيب. يشار إلى وجود مركبات الستيرويد في جزء ن-بوتانول بظهور حلقة خضراء مزرقة بإضافة كاشف LB. تم إجراء فصل مركبات الستيرويد المقسمة باستخدام طريقة كروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة التحضيرية (KLTP) مع نسبة لطيف ن-الهكسان:إيثيل الأسيتات (3,75:1,25). تم بعد ذلك اختبار مركبات الستيرويد المفصولة عن السمية ضد الجمبري ارتيميا سالينا ليتش و تم التعرف عليها بواسطة مقياس الطيف الضوئي (FTIR). حصلت نتائج فصل كروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة التحضيرية (KLTP) على عزلة ستيرويد مفردة ذات لون موضعي أخضر مزرق ظهر عند Rf 0,83. بناءً على نتائج اختبار السمية ، كانت قيمة LC50 لكسر ن-بوتانول 6.84 و قيمة LC50 لعزلات مركب الستيرويد من كروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة التحضيرية (KLTP) كانت 6.35. أظهر التعرف باستخدام كروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة التحضيرية (KLTP) على جزء ن-بوتانول وجود مجموعات دورية -OH, -CH, -C=C, -CH، بينما أظهرت نتائج كروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة التحضيرية (KLTP) امتصاصًا نموذجيًا لمركبات الستيرويد ، مثل -OH, -CH, -C=C، ثنائي ميثيل -CH(CH3)2 ، و كحولات ثانوية