DHA-indusert stressrespons i A549-celler med fokus på ekspresjonen av Beclin 1-genet

Lungekreft av typen NSCLC (non-small cell cancer) er en alvorlig og potensielt dødelig diagnose med få effektive og gode behandlingstilbud. Kunnskap om hvordan naturlige ressurser som omega-3 flerumettede fettsyrer påvirker kreftcellene er viktig for fremtidig behandling av denne typen lungekreft på en mer skånsom og effektiv måte. Cellelinjen A549 ble brukt for å studere apoptose i celler kultivert med en omega-3 fettsyre, nærmere bestemt DHA (docosahexaenoic acid), i ulike konsentrasjoner over én og to cellesykluser i henholdsvis 22 og 44 timer. Apoptose ble studert ved analyse av uttrykket til det autofagiregulerende genet Beclin 1, som har blitt knyttet til apoptotiske signalveier i kreftceller. Cellene ble dyrket i 22 og 44 timer med konsentrasjonene 0, 50 og 100 µg/ml DHA. To cellebrett ble benyttet i studien, der hver konsentrasjon hadde to paralleller innad på brettet. Genekspresjonen av Beclin 1 i cellene dyrket med DHA ble sammenliknet med genekspresjonen av Beclin 1 i kontrollprøvene uten DHA. Dette ble gjort for å studere om cellene gikk i apoptose ved å hemme utrykket av Beclin 1. Analyse av genekspresjonen til Beclin 1 ble utført ved hjelp av 7500 Real Time PCR System hvor genuttrykk ble regnet ut i form av ∆∆Ct- og 2-∆∆Ct-metoden. Videre ble det benyttet t-test og grafisk fremstilling av resultat for å bestemme om cellene var på vei mot apoptose. Det var høye standardavvik innad i parallellene og små differanser mellom kontroll og DHA-påvirkede cellers genekspresjon. Prøvene til brett på 22 timer viste en nedregulering av Beclin 1 ved 50 µg/ml, mens prøvene på 100 µg/ml viste svak oppregulering. Brett på 44 timer viste gradvis nedregulering av Beclin 1 ved begge konsentrasjonene. Det stilles spørsmålstegn ved resultatenes pålitelighet grunnet begrensninger i oppgaven. Konklusjonen er derfor lav til ingen effekt av DHA på A549-celler (NSCLC) over 22 og 44 timer ved konsentrasjoner på 50 og 100 µg/ml