Influence of new cryopreservation protocol on immunogenicity and rejection of arterial allografts in rats

SOUHRN Cílem předložené experimentální práce bylo studovat na potkanním modelu akutní buňkami a protilátkami zprostředkovanou imunitní reakci u příjemců štěpů břišní aorty ošetřených novým standardizovaným klinickým kryokonzervačním protokolem s pomalým rozmrazováním používaným v "Programu transplantace cévních štěpů v České republice". Dalším cílem naší práce bylo porovnat vliv dvou základních typů konzervačních protokolů používaných v tomto programu (kryokonzervační protokol s pomalým rozmrazováním a protokol konzervace chladem) na akutní imunitní reakci po transplantaci takto ošetřených štěpů břišní aorty u potkanů. Kryokonzervované štěpy břišní aorty jsme transplantovali syngenně mezi potkany kmene Lewis (skupina CRYO-ISO, doba kryokonzervace 172,6 dnů) a alogenně mezi potkany kmenů Brown - Norway a Lewis (skupina CRYO-ALO, doba kryokonzervace 179,3 dnů). Štěpy jsme explantovali 30. pooperační den a následně vyšetřili histologickými a imunohistochemickými metodami se zaměřením na typické známky akutní rejekce ve třech základních vrstvách aortální stěny. Sledovali jsme přítomnost endotelových buněk, známky intimální hyperplázie, šířku tunica media, přítomnost nekróz a ukládaní protilátek třídy G v této vrstvě, počet CD4+, CD8+ a LEW MHC II+ imunokompetentních buněk v adventiciální vrstvě aortální stěny....The aim of the presented experimental work was to study an acute cell and antibody- mediated immune response in recipients of abdominal aortic grafts treated by a new standardized clinical cryopreservation/slow thawing protocol used in the "Vascular graft transplant program in the Czech Republic" in a rat model. Another aim of our study was to compare the influence of two basic types of conservation protocols used in this program (cryopreservation/slow thawing protocol and cold-stored protocol) on the acute immune response after transplantation of such treated abdominal aortic grafts in rats. Cryopreserved abdominal aortic grafts were transplanted syngeneously between Lewis rats (CRYO-ISO group, cryopreservation period 172.6 days) and allogeneically between Brown-Norway and Lewis rats (CRYO-ALO group, cryopreservation period 179.3 days). The grafts were explanted on day 30 after transplantation and subsequently examined by histological and immunohistochemical methods, focusing on typical signs of acute rejection in the three basic layers of the aortic wall. We monitored the presence of endothelial cells, signs of intimal hyperplasia, tunica media thickness, the presence of necrosis and deposition of imunoglobulin class G in this layer, the number of CD4+, CD8+ and LEW MHC II+ immunocompetent cells...Institute of Physiology First Faculty of Medicine Charles UniversityFyziologický ústav 1. LF UK1. lékařská fakultaFirst Faculty of Medicin