Homéostasie et résistance au cuivre chez Cupriavidus metallidurans CH34 : la protéine CopH et les transporteurs membranaires CusA et CzcA

The copH gene is one of the 19 genes found in the cop cluster, involved in detoxification of copper from the cytoplasme as well as from the periplasm, in Cupriavidus metallidurans CH34, used as a model to study heavy metals resistance in bacteria. The function of CopH protein, located in the periplasm, is not clear yet, but its expression is induced by copper. We analysed the copper binding properties of CopH. The features are consistent with the presence of Cu(II) type 2 centers in a nitrogen ligand field. The only two histidine residus, ligands of copper as we thought, would not interact directly avec Cu(II) ions. The copper site would consist with 45 nitrogen atoms from the backbone of CopH. The study of membrane transporters CusA and CzcA has needed the optimised purification in detergents and the analysis of their behaviour in solution.Le gène copH est l'un des 19 gènes constituant le cluster cop, impliqué dans la détoxication du cuivre dans le cytoplasme et le périplasme, chez Cupriavidus metallidurans CH34, souche modèle pour l'étude de la résistance aux métaux lourds chez les bactéries. La protéine CopH, localisée dans le périplasme, possède une structure et une fonction inconnues mais son expression est stimulée par la présence de cuivre. Nous avons analysé les propriétés de liaison CopH-Cu : les données montrent la présence d'un centre Cu(II) de type 2 dans un champ de ligands azotés. Les 2 seuls résidus histidine, a priori ligands du cuivre, n'interagiraient pas directement avec les ions Cu(II). Le site cuivre serait constitué d'atomes d'azote appartenant à la chaîne principale de la protéine.L'étude des transporteurs CusA et CzcA a nécessité une purification optimisée en détergents et l'analyse de leur comportement en solution