Oncogène RAS et Cancer Colorectal : Étude de la Réponse au Stress Oncogénique et de l'Échappement à la Sénescence

Oncogene-Induced Senescence (OIS) is a tumor suppressor mechanism which prevent uncontrolled cells proliferation during oncogenic stress. During tumorigenesis, this process is inhibited by inactivation of tumor suppressor genes to allow proliferation and cell transformation. The OIS is described in primary cells, however, we have observed that this mechanism is conserved in transformed cells following the expression of H-RasV12. We investigated the regulation of this line of response in a colorectal adenoma cell line that have already inactivated tumor suppressors p16INK4a and p53. We observed that Ras oncogene induces p53-independent p21Waf1 expression which promotes senescence establishment. Under these conditions, we observed that p21Waf1 inhibits proliferation by transcriptional regulation of cell cycle genes Cdc25A and Plk1. In this work we noticed that some cells escaped to this arrest. By studying the presence of Senescence-Associated Heterochromatin Foci (SAHF), we observed that these cells loss senescence phenotype, and exhibit mesenchymal and dedifferentiation markers. These results suggests that upon expression of the oncogene Ras, some cells escape the OIS and this bypass exhaust is associated with an Epithelial-Mesenchymal Transition (EMT) and emergence of dedifferentiated cells. The bypass of Ras mediated OIS is associated to EMT and dedifferentiation. This mechanism might contribute to tumorigenesis.La sénescence induite par l'oncogène, ou OIS (Oncogene-Induced Senescence), est un mécanisme permettant d'empêcher la prolifération anarchique des cellules lors du stress oncogénique. Lors de la tumorigenèse, ce processus est inhibé par l'inactivation des gènes suppresseurs de tumeurs pour permettre la prolifération et la transformation cellulaire. L'OIS est un processus conservé dans les cellules primaires, cependant, nous l'avons observé dans des cellules transformées à la suite de l'expression de H-RasV12. Nous avons étudié les acteurs de cette réponse dans une lignée d'adénome colorectal ayant déjà inactivé les suppresseurs de tumeurs p16Ink4a et p53. Nous avons observé que l'oncogène Ras induisait l'expression de p21Waf1 et conduisait à la mise en place de la sénescence. Dans ces conditions, nous avons vu que p21Waf1 inhibait la transcription des gènes du cycle cellulaire Cdc25A et Plk1 pour permettre l'arrêt de la prolifération. Au cours de ce travail nous avons remarqué que certaines cellules échappaient à cet arrêt. Par l'étude de la présence de SAHF (Senescence- Associated Heterochromatine Foci), nous avons observé que ces cellules ne présentaient plus ce phénotype caractéristique de la sénescence, mais des marqueurs de cellules mésenchymateuses, et que certaines d'entre elles avaient subi une dédifférenciation. Les résultats que nous avons obtenus indiquent que lors de l'expression de l'oncogène Ras, certaines cellules échappent à l'OIS et que cet échappement est associé à une EMT (Epithelial-Mesenchymal Transition) et à l'émergence de cellules dédifférenciées. L'EMT contribuerait à l'échappement des cellules à l'arrêt du cycle cellulaire