Resonancia magnética nuclear como técnica alternativa para estudios de susceptibilidad a antimicrobianos y del metabolismo de microorganismos difíciles de cultivar

Existen numerosos métodos estandarizados utilizados para determinar la susceptibilidad a antimicrobianos. Éstos, a menudo son lentos y laboriosos y frecuentemente muestran problemas tanto en la precisión como en la reproducibilidad. La aparición de resistencias y la posibilidad de utilizar fármacos menos tóxicos, además de la dificultad que supone el manejo de ciertas bacterias de difícil cultivo, hacen más que necesario el desarrollo de nuevos procedimientos que ayuden a conocer mejor el metabolismo bacteriano, su susceptibilidad a antibióticos y su posible manejo terapéutico. Esta memoria se centra en el uso de la espectroscopia de resonancia magnética nuclear (RMN) para el estudio del metabolismo bacteriano y su aplicación para determinar la sensibilidad de ciertas bacterias a fármacos antimicrobianos Este trabajo recoge la puesta a punto de la técnica de RMN para el estudio de la susceptibilidad de dos cepas de Escherichia coli (ATCC 25922 y C1550) y de Pseudomonas aeruginosa (ATCC 27853 y W30) a varios antimicrobianos (gentamicina, ciprofloxacrno y levofloxacino). Para ello, se comparan los resultados obtenidos mediante RMN con las concentraciones mínimas inhibitorias (CMI) ya establecidas en la literatura y por los Comités pertinentes. Además, y con el objeto de conocer mejor el metabolismo de bacterias de difícil cultivo, se han realizado experimentos con Rickettsia slovaca. Estos análisis han permitido detectar marcadores metabólicos que podrían ser utilizados para estudios de sensibilidad y aportan conocimiento sobre el metabolismo de estos agentes de difícil cultivo.Many standardized methods are used to determine antimicrobial susceptibility. They often slow and laborious and frequently show problems in both accuracy and reproducibility. The emergence of resistances and the possibility of using less toxic drugs, in addition to the difficulty of handling certain fastidious bacteria, make necessary to develop new procedures to better understand bacterial metabolism, their susceptibility to antibiotics and their potential therapeutical management. This work focuses on the use of nuclear magnetic resonance (NMR) spectroscopy for the study of bacterial metabolism and its application to determine the susceptibility of certain bacteria to antimicrobial drugs. This work sets up the NMR to study the susceptibility of two strains of Escherichia coli (ATCC 25922 and C1550) and Pseudomonas aeruginosa (ATCC 27853 and W30) against several antimicrobials (gentamicin, ciprofloxacin and levofloxacin). For this aim, the results obtained by NMR were compared with the minimum inhibitory concentrations (MIC) already established in the literature and by the pertinent Committees. In addition, and in order to better understand the metabolism of bacteria that are difficult to grow, experiments have been carried out on Rickettsia slovaca. These analyzes have allowed to detect metabolic markers that could be used for susceptibility studies and they contribute to the knowledge of the metabolism of these fastidious bacteria