Nuevas técnicas para el estudio de cepas ovinas de Fasciola hepatica con diferente origen y grado de resistencia a fármacos antihelmínticos

Tesis doctoral de la Universidad de León y el Instituto de Ganadería de Montaña (IGM-CSIC). Leída en diciembre del 2015.La primera referencia registrada de la enfermedad causada por Fasciola hepatica tuvo lugar en el año 1379 por el francés Jean de Brye, a quien el rey Carlos V de Francia encargó escribir un tratado sobre la correcta gestión de los rebaños ovinos. Atribuyó la enfermedad al consumo por las ovejas de la hoja de una hierba conocida como “dauve”' que destruía el hígado del animal. En 1523 Sir Anthony Fitzherbert hizo ya referencia al término “flokes” (trematodos), nombre que deriva de la palabra anglosajona "floc", que significa “lenguado”. En 1547, Gabucinus, se refirió al parásito como un helminto similar a una semilla de calabaza. Los antiguos tratados españoles denominan al parásito con nombres diversos como “coscojo”, “caracolillo” o “palomita” (Rojo-Vázquez & Gómez-Bautista, 1989; Díez Baños, 2011). Francesco Redi en 1668 recuperó fasciolas del hígado de un carnero y de la bilis de una liebre, haciendo constancia de la ubicación biliar del parásito (Rojo-Vázquez et al., 2012). En 1698, Godefridus Bidloo, observó los huevos por primera vez y describió el parásito así como partes de su anatomía, confirmando su hermafroditismo (Gómez-Bautista & Rojo-Vázquez, 1994a); y Pierre Pallas en 1760 extrajo en una necropsia humana fasciolas de los conductos biliares. Otros investigadores como Mehlis, Blanchard, Leuckart, Sommer y Macé ya con posterioridad, describieron la anatomía del parásito de forma más detallada. Entre los acontecimientos históricos relacionados con el parásito, dignos de tener en cuenta, nos encontramos con los siguientes: • 1773: observación de las cercarias por Müller y su enquistamiento por Nitzsch en 1817.• 1818: detección de la redias en el caracol por Bojanus, denominándolas así en honor a Redi (Cordero del Campillo & Rojo Vázquez, 1999), aunque ya en 1738, Schwammerdan las había identificado sin saber darlas un significado. • 1831: descripción del huevo y del miracidio por Mehlis, confirmando Creplin en 1837 la transformación del miracidio a partir del huevo. • 1842: Steenstrup introdujo el concepto de “alternancia de generaciones” para explicar la relación entre los distintos estadios larvarios con el parásito adulto. • 1874: Weinland descubrió la relación entre los estadios larvarios y Galba truncatula, haciéndole pensar que podría tratarse del hospedador intermediario (Taylor, 1937). Esta teoría fue confirmada por Leuckart y Thomas en 1882 con el descubrimiento del ciclo biológico, y por Lutz en 1892, cuando confirmó que eran las metacercarias las que daban lugar al adulto. Sinitzin completó el ciclo biológico en 1914, cuando describió las rutas migratorias intraorgánicas (Andrews, 1999). El descubrimiento del ciclo sirvió como modelo para otras parasitosis de trematodos digeneos en los que se sospechaba que podía existir algún hospedador intermediario.Los trabajos que conforman esta Tesis Doctoral se han realizado gracias a la financiación correspondiente al siguiente proyecto y contrato de investigación: "Caracterización de la resistencia a los antihelmínticos y desarrollo de estrategias para el control antiparasitario en el marco del cambio climático. Zona noroeste" (Ref. RTA2010-00094-CO3-02). Instituto Nacional de Investigación y Tecnología Agraria y Alimentaria (INIA). Ministerio de Ciencia e Innovación (2010-2013). Investigadora responsable: Dra. Dña. María Martínez Valladares.D. Robles Pérez; P. García García; J. M. Martínez Pérez; F. A. Rojo Vázquez; M. Martínez Valladares. (2014). Analysis of genetic variability of Fasciola hepatica populations from different geographical locations by ISSR-PCR. Parasitology, 142(4): 527-533. Cambridge. http://dx.doi.org/10.1017/S003118201400153XD. Robles Pérez; J. M. Martínez Pérez; F. A. Rojo Vázquez; M. Martínez Valladares. (2013). The diagnosis of fasciolosis in feces of sheep by means of aPCR and its application in the detection of anthelminticresistance in sheep flocks naturally infected. Veterinary Parasitology 197(1-2): 277-282. Elsevier. http://dx.doi.org/10.1016/j.vetpar.2013.05.006D. Robles Pérez; J. M. Martínez Pérez; F. A. Rojo Vázquez; M. Martínez Valladares. (2014). Development of an egg hatch assay for the detection of anthemintic resistance to albendazole in Fasciola hepatica isolated from sheep. Veterinary Parasitology 203 (1-2): 217-221. Elsevier. http://dx.doi.org/10.1016/j.vetpar.2013.11.020Robles Pérez, D.; Martínez Pérez, José Manuel; Rojo Vázquez, Francisco Antonio; Martínez Valladares, María. (2015). Screening anthelmintic resistance to triclabendazole in Fasciola hepatica isolated from sheep by means of an egg hatch assay. BMC Veterinary Research, 11: 226. BioMed Central. http://dx.doi.org/10.1186/s12917-015-0543-1Peer reviewe