Produção, purificação, caracterização e viabilidade de aplicação da dextranase de penicillium SP

Resumo: Oitocentas e sessenta e três linhagens de fungos foram isoladas do solo de plantações de cana de açúcar, assim como de varas de cana deterioradas, e testadas quanto ã atividade dedextranase. Nesta seleção, foi encontrada uma linhagem de Penicillium sp que produz alta atividade de dextranase quando cultivada em meio líquido contendo dextrana como única fonte de carbono. Estudaram-se as condições ótimas de produção de dextrana se, quanto à fonte de carbono, de nitrogênio, concentração de dextrana no meio e temperatura de incubação. A dextranase foi produzida em fermentação submersa em meio contendo dextrana, farinha de soja desengordurada, extrato de leveduras, KH2P04 e MgS04.7H20 em pH 6,0 a 30ºC. A enzima bruta foi purificada através de cromatografia em coluna de DEAE-celulose e de CM-celulose. A caracterização da enzima mostrou que a temperatura ótima da dextranase é de 50ºC, e o ph ótimo de 4,2. A enzima se mantém estável a 40ºC durante 7 horas. O pH de estabilidade se encontra na faixa de pH 4,2 a 5,0. A dextranase de Penicillium sp é fortemente inibida por íons Ag+, Mn2+, F2+ e Hg2+. Na hidrólise da dextrana a enzima .libera, isomaltose e isomaltotriose como produtos principais. Na aplicação da dextranase de Penicillium sp na hidrólise da dextrana em caldo de cana e em açúcar cristal, a mesma apresentou resultados satisfatóriosAbstract: Eight hundred and sixty three strains of fungi were isolated from cane sugar fields and deteriorated cane sugar and examined for production of dextranase. It was found a strain of Penieillium sp which has produced highest activity of dextranase when the strain was cultivated in liquid medium which contained dextran as toe sole carbon source. The optimal condition for dextranase production by the fungus was studied and found that dextranase was produced in submerged culture in medium containing dextran, 5g; defatted soy flour, 10g; yeast extract. 5g; KH2P04, 5g and MgS04.7H20, 2,5g in 1 liter, pH 6,0 at 30ºC. The crude enzyme was purified by DEAE-cellulose and CH cellulose column chromatograpoy. The enzyme was most active at pH 4,2, and the temperature optimum was near 50ºC. The dextianase was stable over a pH range from 4,2 - 5,0 at 40ºC for 7 hours. The enzyme was strongly inhibited by Ag+, Mn2+, Fe2+ and Hg2+ ions. The main hydrolysis products of dextran were glucose, isomaltose and isomaltotriose. The application of Penieillium sp dextranase in removing dextran from raw cane sugar juice and raw sugar showed satisfactory result