Estudo cromatografico das saponinas da quinua (Chenopodium quinoa Willd, variedade Kancolla)

Resumo: As saponinas da quinua (Chenopodium quinoa Willd., variedade Kancolla) foram submetidas a um estudo que compreendeu extração, detecção, purificação parcial, hidrolise e determinação do ácido oleanólico nas suas sapogeninas. Dos vários processos de extração testados, foi selecionado um que consiste de duas etapas: extração das sementes desengorduradas, primeiro com gradiente de etanol-butanol-água e depois com água a pH 4 sendo este extrato aquoso, posteriormente, submetido a partição com butanol.. Tal processo forneceu 5,53% de extrato bruto de saponinas. A presença de saponinas numa serie de extratos foi verificada mediante os seguintes métodos: medição da espuma (afrosimetria), hemólise in vitro e camada delgada, usando os reagentes Liebermann-Burchard, sangue-gelatina e outros. Embora alguns destes métodos sejam de emprego comum na determinação industrial das saponinas da quinua, os nossos resultados indicaram que, como critério único, tais testes são inapropriados para determinações quantitativas ou ainda qualitativas, devido a sua inespecificidade. O extrato de maior teor de saponosídeos (P28) foi semi-purificado em coluna de sílica gel com o solvente clorofórmio-metanol-água (65:35:8), obtendo-se, pelos menos, uma fração representativa das saponinas na base dos resultados da cromatografia em camada delgada. Tanto o extrato P28 como as suas frações semi-purificadas foram submetidos à hidrólise com ácido sulfúrico em dioxano a 50% para posterior estudo das sapogeninas. Separação gás-cromatográfica dos derivados trimetilsililados dos produtos menos polares da hidrólise indicou que as saponinas da quinua Kancolla podem conter até dez sapogeninas, sendo que o ácido oleanólico perfaz 79,5% (estimativa obtida por normalização interna) das geninas presentes no extrato P28. Conclui-se que, dentro das limitações do método cromatográfico, as saponinas desta variedade de quinua poderiam ser classificadas como triterpenóides, sendo que o conteúdo de ácido oleanólico dos extratos teria possível aplicação na dosagem de saponinas da quinua e seus produtosAbstract: For the present study, the saponins of quinua (Chenopodium quinua, Willd.; Kancolla variety) grains were extracted, subjected to various detection tests, partly purified, hydrolyzed and assessed with regard to the oleanolic acid content. From the several methods of extraction tested, one was selected which included: first a step-wise reflux operation with mixtures of ethanol-n-butanol-water, and then water extraction at pH 4 followed by partition of the latter solution with n-butanol. Such process afforded a yield of crude extract of 5,53%. The presence of saponins in all extracts was monitored by using methods such as foam measurement, (n-vitro hemolytic power, as well as by thin-layer chromatography in conjunction with the Liebermann-Burchard and blood-gelatin indicators. Although most of these procedures are often employed in the determination of quinua saponis by industry, results suggest that on an individual bases, such tests are not adequate for quantitative or even qualitative determinations due to the lack of specificity. The extract exhibiting the most saponin character (P28) was partly purified on a silica-gel column using a mixture of chloroform-methanol-water (65:35:8) as eluent. The extract itself and several of the semi-purified fractions were hydrolyzed with sulfuric acid in 50% dioxane for further study of the constituting sapogenins. Gas-chromatographic separations of the trimethylsilylated, less-polar products of the hydrolysis reaction on P28 indicated that the Kancolla quinua saponins may contain as many as ten different sapogenins. By internal normalization of the chromatograms, oleanolic acid was estimated to be 79.5% of the total genins in this extract. Within the limitations inherent to the chromatographic method, it was concluded that the saponins of this quinua variety could be classified as of the triterpene type. Moreover, direct determination by gas-liquid chromatography of the oleanolic acid or, alternatively, of the total sapogenin content could be used as an indicator of the saponin level in quinua and its product