Isolamento e sistematica de actinomicetos degradadores de herbicidas

Resumo: Diversas linhagens de actinomicetos foram isoladas seletivamente a partir de amostras de solos previamente tratados com os herbicidas alachlor, gramocil e scepter 70DG. Ensaios de seleção e triagem de linhagens resistentes a concentrações elevadas dos herbicidas foram realizados com as culturas puras utilizando meio sólido suplementadocom concentrações crescentes dos herbicidas especificados. Dentre as diversas linhagens testadas, 9 isolados demonstraram ser tolerantes à altas concentrações de gramocil, 11 à de scepter e 16 à alachlor. As 16 linhagens isoladas de amostras de solo enriquecido com alachlor foramavaliada quanto à capacidade de degradação in vitro deste herbicida em ensaios utilizando meio mineral líquido contendo como única fonte de carbono o alachlor e seus produtos de hidrólise nas concentrações de 150 e 300 JlL/L. Seis linhagens LS143, LS151, LS153, LS166, LS177 e LS182 foram capazes de transformar entre 50 e 80% do herbicida nas concentrações testadas, formando principalmente compostos indólicos e quinolínicos desclorinados, sem a geração de 2,6-dietilanilina (DEA), um intermediário carcinogênico relatado como um dos principais produtos de degradação/transformação do alachlor. Os melhores resultados foram obtidos com os isolados LS166, LS177 e LS182. A caracterização taxonômica dos isolados degradadores de alachlor, realizada empregando-se metodologias de caracterização fenotípica, genotípica e análise filogenética, resultou na alocação destes no gênero Streptomyces. A linhagem LS151 foi putativamente identificada como S. galbus e os isolados LS 143 e LS 153como S. bikiniensis. As linhagens LS166, LS177 e LS182 mostraram-se similares entre si fenotipica e genotipicamente, efilogeneticamente distantes das espécies descritas na literatura, podendo potencialmente representar espécies novas de estreptomicetosAbstract: Several actinomycete strains were selectively isolated from soi! samples previously treated with the herbicides alachlor, scepter 70DG and gramocil. Screening of highly resistant strains were performed by growing the pure cultures on solid media supplemented with increasing concentrations of the selected herbicides. From all strains tested, 9, 11 and 16 isolates were resistant to high concentrations of gramocil, scepter and alachlor,respectively. The 16 strains isolated from soil samples enriched with alachlor were evaluated regarding their ability to degrade this herbicide in vitro. Assays were performed by using a liquid mineral medium supplemented with 150 or 300 flL/L of alachlor and its natural hydrolysis products as the sole carbon sources. Strains LS143, LS151, LS153, LS166, LS177 and LS182 were capable of transforming between 50 and 80% of the herbicide onthe concentrations tested, yielding mainly indolic and dechlorinated quinolinic compounds, without the generation of 2,6-diethyllaniline (DEA), a carcinogenic intermediate cited as one of the main degradation/transformation products. The best results were obtained withstrains LS166, LS177 and LS182. The taxonomic characterization of the alachlor-degrading strains was performed by using a combination of phenotypic, genotypic, and phylogenetic methods. All strains wereassigned to genus Streptomyces. Strain LS151 was putatively identified as S. galbus and strains LS143 and LS153 as S. bikiniensis. Strains LS166, LS177 and LS182 were highly related and could not be identified to any of the species listed in the 16S RNAr sequence databases consulted. These isolates could represent novel streptomycete specie