Effect of therapeutic nutrition on the basis of Camellia sinensis (green tea) and glycine-diet on the tendinitis of Achilles tendon of rats

Nutrição terapêutica é a administração de alguns nutrientes, em doses maiores que as necessidades alimentares diárias que podem prevenir deficiências orgânicas e atuar como agentes farmacológicos. A glicina apresenta amplos efeitos benéficos em processos inflamatórios e tumorais. O Chá verde feito de folhas e brotos da planta Camellia sinensis, é a segunda bebida mais consumida em todo mundo. O interesse econômico e social tem ganhado espaço no mercado e atualmente seu consumo faz parte da rotina diária de muitas pessoas que utilizam essa bebida como uma finalidade terapêutica. O Chá verde possui propriedades antimutagênicas, antidiabéticos, antiinflamatórias, antioxidante, antimicrobial e hipocolesterolêmica. A tendinite é reconhecidamente um problema clínico que motiva a comunidade científica a buscar tratamentos que auxiliem no restabelecimento das propriedades funcionais dos tendões. O presente estudo investigou o efeito do chá verde e ou da ração rica em glicina após 7 e 21 dias da indução da tendinite com colagenase. Ensaios bioquímicos, moleculares, morfológicos e biomecânicos foram desenvolvidos. Além disso, tenócitos em cultura foram tratados com glicina após inflamação induzida por TNF-α. Nossos ensaios in vivo mostraram altas concentrações de hidroxiprolina e glicosaminoglicanos no grupo glicina e chá em 21 dias de tratamento. Nos ensaios biomecânicos os grupos chá verde e dieta de glicina em 21 dias suportaram maiores cargas biomecânicas antes da ruptura. Além disso, uma melhor organização das fibras de colágeno foi observada no grupo chá verde em 7 dias. Análises bioquímicas e moleculares da junção miotendínosa mostraram que a inflamação instalada na região osteotendinea pode provocar alterações significativas nesse local. Marcantes alterações foram notadas nas metaloproteínases (MMP) tais como MMP-2, MMP-8 e MMP-9 em animais com tendinite tratados ou não com chá verde e glicina. No estudo in vitro, tenócitos extraídos a partir de tendão de Aquiles foram tratados com TNF-α, seguindo ou não de tratamento com glicina em meio de cultura. Antes e após 24 horas da inflamação foi adicionado glicina. Tenócitos inflamados e tratados com glicina mostraram expressão de colágeno tipo I próxima aos grupos tratados com glicina previamente e depois da inflamação quando comparado ao grupo controle. Todos os grupos tratados com glicina mostraram menor expressão de MMP-2. A atividade da MMP-9 foi alta apenas no grupo tratado com glicina em 48 horas. A concentração de ácido urônico foi menor no grupo tratado com glicina 24 horas após a inflamação. No ensaio de migração celular, resultados em 24 horas de tratamento foram similares ao grupo controle. Em geral, tanto a glicina quanto o chá verde influenciam na síntese dos componentes do tendão, melhoram a organizaçao das fibras colagênicas, aumentam a resistência a cargas do tendão inflamado e consequentemente aceleram o processo de remodelamento após indução da tendinite. Além disso, o tratamento com glicina em cultura de tenócitos mostrou uma reorganização eficiente da matriz extracelular, corroborando com os resultados encontrados in vivo.Therapeutic nutrition is the administration of some nutrients, in higher doses than those recommended for the daily food needs that can prevent dysfunctions and act as pharmacological agents. Glycine has large beneficial effects in inflammatory and tumor processes. Green tea made from leaves and buds of the Camellia sinensis plant, is the second most consumed beverage in the world. The economic and social interest has gained space in the market and currently its consumption is part of the daily routine of many people who use this drink as a therapeutic purpose. Green tea has antimutagenic, antidiabetic, anti-inflammatory, antioxidant, antimicrobial and hypocholesterolemic properties. Tendinitis is recognized as a clinical problem that motivates the scientific community to investigate treatments that help in restoring the functional properties of tendons. The present study investigated the effect of green tea and/or diet rich in glycine after 7 and 21 days of tendinitis collagenase-induced. Biochemical, molecular, morphological and biomechanical tests were developed. Furthermore, tenocytes in culture were treated with glycine after inflammation induced by TNF-α. Our tests in vivo showed high concentrations of hydroxyproline and glycosaminoglycans in glycine and green tea group in 21 days of treatment. In biomechanical assay, green tea and glycine diet groups in 21 days showed a high biomechanical loads bore before rupture. In addition, better organization of collagen fibers was observed in green tea group in 7 days. Biochemical and molecular analyzes of myotendinous junction showed that the inflammation installed in osteotendinious region can cause significant change in that region. Remarkable changes were noted in metalloproteinases (MMP) such as MMP-2, MMP-8 and MMP-9 in animals with tendinitis treated with or without glycine and green tea. In the in vitro study, tenocytes from Achilles tendon were treated with TNF-α, or not following treatment with glycine in the culture medium. Before and 24 hours after inflammation was added glycine. Tenocytes inflamed and treated with glycine showed expression of collagen type I close to the treated groups with glycine previously and after the inflammation when compared to the control group. All treated groups showed less glycine MMP-2 expression. The activity of MMP-9 was high only in the group treated with glycine for 48 hours. In the cell migration assay results in 24 hours of treatment were similar to the control group. In general, both glycine and green tea influenced the synthesis of the tendon components, improve the organization of the collagenous fibers, increase the load resistance of the inflamed tendon and consequently accelerate the remodeling process after inducing tendinitis. In addition, the treatment with glycine in tenocytes culture showed efficient reorganization of the extracellular matrix, confirming the results found in vivo