Avaliação da matriz extracelular e da estrutura de biofilmes de Candida albicans desenvolvidos em diferentes condições de pH

A colonização da prótese dental por Candida albicans pode contribuir para o desenvolvimento de candidose associada ao seu uso. As variações de pH que ocorrem no biofilme formado sobre a prótese dental podem influenciar a quantidade de matriz extracelular e a estrutura do biofilme de C. albicans. Entretanto, não está claro como o pH pode interferir na matriz extracelular e em determinados parâmetros estruturais nos biofilmes de C. albicans. O objetivo neste estudo foi avaliar a influência do pH na quantidade de matriz extracelular e na estrutura de biofilmes de C. albicans. Discos de resina à base de poli (metilmetacrilato) com a rugosidade de superfície padronizada foram utilizados como substrato para a formação dos biofilmes. Os discos foram cobertos por uma película de saliva e biofilmes de C. albicans ATCC 90028 foram desenvolvidos em meio de cultura RPMI 1640 tamponado em diferentes valores de pH (4,0, 5,5 e 7,0) por 48 horas como grupos experimentais, e meio de cultura sem o tamponamento (pH inicial de 7,4) como grupo controle. O número de células viáveis foi quantificado por diluição seriada, e a quantidade de matriz de polissacarídeos foi analisada pelo método fenol-sulfúrico (n = 9). As características morfológicas dos biofilmes foram observadas por meio de microscopia eletrônica de varredura e por microscopia confocal (n = 3). Os resultados foram submetidos à análise de variância com um fator, seguido pelo teste de Tukey, com nível de significância de 5%. Observou-se aumento significativo no número de células viáveis nos biofilmes desenvolvidos em pH 4,0 e 5,5 (p < 0,001). A quantidade de polissacarídeos foi maior em pH 5,5, seguida por biofilmes desenvolvidos em pH 4,0 (p < 0,05). As imagens obtidas por microscopia eletrônica de varredura e por microscopia confocal mostram maior formação de hifas pelos biofilmes quando desenvolvidos em pH 7,0 e no grupo controle. Pode ser concluído que condições de pH ácidos influenciaram a formação de biofilmes com o maior número de células viáveis e, consequentemente, maior quantidade de matriz extracelular. Além disso, o pH afetou consideravelmente a morfologia dos biofilmes de C. albicans.The colonization of dental prosthesis by Candida albicans may contribute to the development of Candida-associated denture stomatitis. The pH changes that occur in the biofilm developed over the dental prosthesis may influence the amount of extracellular matrix and the structure of C. albicans biofilms. However, it is not clear how the pH could interfere in the extracellular matrix and specifically structural parameters of C. albicans biofilms. The object of this study was to evaluate the influence of environmental pH on the amount of extracellular matrix and structure in C. albicans biofilms. Poly (methylmethacrylate) resin discs with surface roughness standardized were used as substrate for biofilm formation. The discs were covered by the salivary pellicle, and C. albicans ATCC 90028 biofilms were developed in RPMI 1640 culture medium buffered at different pH values (4.0, 5.5 and 7.0) for 48 hours as experimental groups, and unbuffered culture medium (initial pH of 7.4) as control. The number of viable cells was quantified by serial dilution, and the amount of polysaccharide matrix was analyzed by phenol sulfuric method (n = 9). The morphological characteristics of biofilms were observed by scanning electron microscopy (SEM) and confocal laser scanning microscopy (CLSM) (n = 3). Data were analyzed by one-way ANOVA, followed by Tukey´s test, with significance set at 5%. It was observed a significant increase in the number of viable cells in biofilms developed at pH 4.0 and 5.5 (p < 0.001). The amount of polysaccharides was higher at pH 5.5, followed by biofilms developed at pH 4.0 (p < 0.05). The images obtained by SEM and CLSM showed higher hyphae formation by biofilms developed at pH 7.0 and in the control group. It can be concluded that acidic pH conditions influenced the formation of C. albicans biofilms, with higher viable cells and, consequently, higher amount of extracellular matrix. Furthermore, the pH significantly affected the morphology of C. albicans biofilms