Insulin influences tissues changes and the kinetics of epithelial cell death in the rat ventral prostate after castration

O crescimento e a fisiologia da próstata é dependente da expressão de receptores esteróides em alguns tipos celulares e de interações parácrinas estabelecidas após a resposta inicial a esses hormônios, em associação com hormônios somatotróficos como a insulina. O presente trabalho tem o objetivo de caracterizar componentes moleculares relacionados aos mecanismos de adaptação das células epiteliais prostáticas de rato na ausência andrógeno e/ou insulina e possíveis conexões com as vias gerais de regulação do metabolismo celular, monitorando diferentes pontos da via de sinalização integradas pelos TSC1-TSC2 e mTORC1 e mTORC2. Foram empregados 54 ratos Wistar adultos jovens com idade entre 75 e 105 dias. Os animais foram induzidos diabetes por injeções intraperitoneal de aloxana, em seguida, os ratos foram divididos em não diabético (ND), diabético (DIA) e diabético tratado com insulina (INS), somados a castração cirúrgica e sacrificados 48 e 72 horas após a castração. Utilizando a técnica de Western Blotting foram analisados os conteúdos e fosforização de mTOR, p70S6K, eIF4B, 4E-BP, eIF4E e p53. Os resultados obtidos no presente trabalho identificam uma nítida função do estímulo androgênico na regulação negativa de eIF4E (via 4E-BP1) e positiva de eIF4B. Ficou claro também que a insulina regula positivamente a fosforilação de 4E-BP1 e que a privação androgênica promove aumento de p53. Assim dois mecanismos parecem essenciais para a manutenção e seleção das células epiteliais prostáticas de ratos: (I), p53/4E-BP/eIF4E na ausência de andrógeno; (II), p70S6K/eIF4B na ausência de insulina. Apoio financeiro: CNPq, Capes / DS e FAPESP.The growth and physiology of the prostate is dependent on steroid receptors in certain types of cells and the paracrine interactions established after the initial response to these hormones in combination with somatotropic hormones such as insulin. The current work aims to characterize the molecular components related to the adaptation mechanisms of the epithelial cells in the prostate of rats. In addition to the absence of androgen and/or insulin and possible connections with the general pathways regulating cell metabolism, monitoring different points of the signaling pathways that integrate TSC1- TSC2 and mTORC1 and mTORC2. 54 male Wistar rats aged between 75 and 105 days were used for the current work. Diabetes was induced by intraperitoneal injection of alloxan and the rats were divided into non-diabetic (ND), diabetic (DIA) and diabetic treated with insulin (INS) groups. Every group was divided into three sub groups and the rats were sacrificed non castrated, surgically castrated 48 and 72 hours. Using Western blotting the contents and phosphorylation of mTOR, p70S6K, eIF4B, 4E- BP, eIF4E and p53 were analyzed. The results obtained in this study identify a clear function of androgenic stimulation in the negative regulation of eIF4E (by 4E-BP1) and positive regulation eIF4B and p53. It also became clear that insulin positively regulates the phosphorylation of 4E-BP1. In conclusion two mechanisms seem to be essential for the maintenance and selection of prostatic epithelial cells in rats: (I) p53/4E-BP/eIF4E in the absence of androgen, (II ) p70S6K/eIF4B in the absence of insulin. Financial support: CNPq , CAPES / DS and FAPESP