Induction of nociceptive stimulus in TMJ region : minimum effective concentration of piperine in normality, local chronic inflammation and chronic stress conditions

A disfunção temporomandibular pode afetar músculos mastigatórios, articulação temporomandibular (ATM) ou ambos; possui elevada prevalência nas mulheres e sintoma mais comum é a dor. Foi proposto determinar mínima concentração efetiva da piperina para ativar o Potencial Receptor Transiente Vanilóide da subfamília 1 (TRPV1) na região da ATM direita de ratas Wistar, nas condições: normalidade, inflamação crônica na ATM, estresse crônico e associação destas. Foram desenvolvidos 2 estudos experimentais, randomizados, duplo-cegos (protocolo nº 2633-1). No estudo I, 48 animais foram distribuídos aleatoriamente em seis grupos, e cada grupo recebeu 30 &#956;l na ATM de uma das soluções: solução padrão (10% de álcool etílico, 10% de Tween 80 e 80% de solução salina estéril) ou 1, 2, 3, 4 e 5 &#956;g de piperina diluída em 100 ml da solução padrão. No estudo II, 144 ratas foram aleatoriamente distribuídas em grupos: A - inflamação crônica na ATM direita induzida pelo Adjuvante Completo de Freund; B - estresse crônico provocado pelo modelo crônico de estresse; C - associação dessas condições. Esses grupos foram subdivididos (n = 8), e injetados na ATM 30 &#956;l das mesmas soluções descritas previamente. Nos estudos, as ratas, na fase diestro do ciclo hormonal, após injeção de uma das soluções, foram avaliadas quanto ao comportamento nociceptivo, que consistia em quantificar o número de vezes que as ratas levantaram a cabeça abruptamente e tempo dispendido, em segundos (s), para coçar a região orofacial. Cada levantar da cabeça seguiu padrão uniforme de 1 segundo de duração, assim, os comportamentos foram expressos em função do tempo, possibilitando somatória. Para comparação estatística, foi empregado análise da variância e teste de Tukey-Kramer (P< 0,05). No estudo I, existiu diferença significante para comportamento de coçar a região orofacial entre os grupos de 2 &#956;g e 5 &#956;g (100,37 ± 63,81 s; 100,0 ± 60,5 s, respectivamente) e o controle (33.37 ± 18,48 s), e somatória dos comportamentos entre 2&#956;g (130,87 ± 257,88 s) e o controle (62.75 ± 14,81 s). No estudo II, no grupo A, houve diferenças estatísticas significativas para os comportamentos de levantar a cabeça no grupo de 5&#956;g (69,5 ± 16,44 s) e o controle (41,13 ± 15,06 s); coçar a região orofacial entre 4&#956;g (51,5 ± 28,73 s) e o controle (14,71 ± 7,54 s), e na somatória entre 4 e 5&#956;g (105,37 ± 22,64 s; 115,50 ± 35,14 s, respectivamente) e o controle (52,86 ± 17,46 s). No grupo B, nos comportamentos de levantar a cabeça entre 4 &#956;g (85,87 ± 19,21 s) e o controle (49,87 ± 10,70 s); coçar a região orofacial entre 5 &#956;g (48,25 ± 27,25 s) e o controle (35,75 ± 12,69 s). No grupo C, não houve diferença significante nos subgrupos. Assim, 0,02 &#956;g/ml de piperina mostrou-se a concentração mínima eficiente para provocar estímulo nociceptivo na condição de normalidade; a solução de 0,04 &#956;g/ml de piperina, para os grupos de inflamação crônica articular e de estresse crônico e para o grupo de associação das condições não foi evidenciado diferença estatística significante.Temporomandibular Dysfunction may affect the masticatory muscles, temporomandibular joint (TMJ) or both, has high prevalence in women and most common symptoms is pain. It was proposed to determine minimal effective concentration of piperine to activate the transient receptor potential vanilloid subfamily 1 (TRPV1) in the right TMJ in Wistar female rats under the conditions: normal, chronic inflammation in the TMJ, chronic stress and inflammation and stress combination. It was developed two randomized double-blind experimental studies (n. 2633-1). In study I, 48 animals were randomly divides into six groups, each group received 30 &#956;l into the TMJ one of this solutions: standard solution (80% sterile saline, 10% Tween 80 and 10% ethyl alcohol) or 1, 2, 3, 4 and 5 &#956;g of piperine diluted in 100 ml of standard solution. In study II, 144 rats were randomly divided into groups: A – chronic inflammation in the right TMJ induced by Freund’s Complete Adjuvant; B – chronic stress caused by chronic stress model; C – association of these conditions. These groups were divided (n = 8), and it was injected into the TMJ 30 &#956;l of the same solutions as previously describe. In both studies, rats in diestrous phase of the hormonal cycle, after injection of the solution, were assessed for nociceptive behavior, which consisted in quantify how many times the rats flinched its head and the time spent, in seconds (s), to rub the orofacial region. Each head flinch followed uniform pattern of 1 second duration, and the behaviors were expressed as time function, allowing the sum. For statistical comparison, it was used variance analysis and Tukey-Kramer (P