Analysis of clinicopathologic features, cell proliferation, and alteration of copies number and methylation of tumor suprressor genes in carcinoma ex-pleomorphic adenoma

O Carcinoma ex-adenoma pleomorfo (CXAP) é uma neoplasia indolente, cuja patogênese ainda não está esclarecida, embora se acredite que resulte do acúmulo de alterações genéticas em adenoma pleomorfo (AP) de longa permanência. No presente estudo, avaliamos os fatores clincopatológicos em uma série de 38 casos de CXAP provenientes de três instituições do estado de São Paulo, Brasil. Analisamos também, o índice de proliferação celular, através da imunomarcação de Ki-67 em 36 APs, 22 APs provenientes de CXAP e 36 CXAPs nas diferentes fases de progressão maligna (precoces e francamente invasivos), subdivididos quanto aos tipos histológicos, a fim de determinar uma possível ferramenta de auxílio diagnóstico. Com estes mesmos grupos de tumores, estudamos o perfil genético de ganho e perda de número de cópias e metilação de genes supressores de tumor, através da técnica de Multiplex Ligation Probe-Dependent Amplification (MLPA). Os resultados mostraram características clinicopatológicas semelhantes às descritas em grandes séries da literatura. Observamos que a marcação de Ki-67 pode ser uma útil ferramenta na distinção entre AP e CXAP, mesmo em fases precoces de transformação maligna. Este índice mostrou não ser importante para distinção dos subtipos histopatológicos. Além disso, encontramos várias alterações em genes supressores de tumor presentes durante a tumorigênese do AP e carcinogênese do CXAP, e observamos um aumento cumulativo de alterações genômicas, sendo algumas delas, específicas para cada fase.Carcinoma ex pleomorphic adenoma (CXPA) is an aggressive neoplasm, and its pathogenesis is still unclear, although it is believed to result from the accumulation of genetic alterations in pleomorphic adenomas (PAs) with long duration. In the present study, we evaluated the clinicopathological features in a series of 38 cases of CXPA from three institutions of the state of Sao Paulo, Brazil. We also analyzed the index of cell proliferation by labeling of Ki-67 in 36 PA, 22 PA from CXPA, and 36 CXPA in different stages of malignant progression (early and frankly invasive) subdivided in histolopathological types, to determine a possible tool to aid the diagnosis. With the same groups of tumors, it was studied also the genomic profile of gain and loss of copy number and methylation of tumor suppressor genes across Multiplex Ligation-Dependent Probe Amplification (MLPA). The results showed similar clinicopathological features to those described in large published series. We observed that Ki-67 is a useful tool in distinguishing between PA and CXPA, even in the early stages of malignant transformation. This index showed no importance for distinction among the several histological subtypes of CXPA. Furthermore, we find that various tumor suppressor genes are altered during PA tumorigenesis and CXPA carcinogenesis, and there is an accumulative increase of genomic alterations that seems to be specific for each phase