Effect of demineralization time on enamel caries-like lesions produced on smooth and occlusal surfaces : cross-sectioned microhardness and lesion depth analyses

Apesar do avanço da Odontologia Preventiva, a doença cárie ainda apresenta-se com alta prevalência na população geral, podendo considerar a superfície oclusal como a mais susceptível à manifestação de lesão subsuperficial, devido aos aspectos morfológicos estruturais. Porém, grande parte dos estudos in vitro de indução de cárie incipiente é dirigida em superfície lisa, escassos são os trabalhos em superfície oclusal. Dessa forma, o objetivo deste estudo foi avaliar quantitativamente por Microdureza Transversal (MD) e qualiquantitativamente por Microscopia de Luz Polarizada (LP) o efeito do tipo de superfície (oclusal e lisa) e tempo de imersão (10h e 16h) em solução desmineralizadora subsaturada por hidroxiapatita, na produção de lesão artificial subsuperficial de cárie em esmalte (LASCE). Terceiros molares humanos recém-extraídos foram limpos e seccionados, obtendo-se por dente: dois fragmentos da superfície lisa (L) e um da oclusal (O). Para padronizar os dentes a serem submetidos ao desafio cariogênico o bloco mais plano da superfície lisa foi submetido à análise de microdureza, os dentes selecionados foram os que apresentaram dureza em torno da média com variação de mais ou menos 10%. Destes 45 blocos da superfície lisa e 45 da superfície oclusal do mesmo dente foram aleatoriamente selecionados, os fragmentos foram cobertos com verniz ácido-resistente deixando uma área de 4x4 mm de esmalte exposto e divididos aleatoriamente em três grupos (n=15) para cada substrato superfície lisa - L [Controle (CoL), 10 horas (10L) e 16 horas (16L)] e superfície oclusal - O [Controle (CoO), 10horas (10O) e 16 horas (16O)]. Posteriormente, os espécimes foram imersos na solução desmineralizadora subsaturada em relação à hidroxiapatita pelo tempo determinado de cada grupo, lavados e seccionados longitudinalmente na área exposta em duas partes. Cada parte de um fragmento foi embutida em resina acrílica, polida e analisada em MD e LP. Para análise da MD foram feitas 10 endentações em diferentes profundidades: 10, 20, 30, 40, 50, 70, 90, 110, 140, 170 ?m em 3 pontos distintos, obtendo-se as médias em cada profundidade. Para LP, a profundidade das lesões foram tomadas medias lineares da profundidade da lesão em 3 distâncias distintas e as médias obtidas. Foi realizada uma análise multivariada de modelo misto a três critérios para MD e o modelo misto a dois critérios para as medidas de LP. As comparações múltiplas foram obtidas pelo teste de Tukey (p<0,05). Os resultados mostraram haver interação significativa entre os fatores grupo e profundidade (p<0,001). Independente da profundidade. A comparação geral pelas médias indicou que a MD na face O foi significativamente maior que na L, independente dos grupos e da profundidade. Quanto à profundidade das lesões, pode-se observar tanto na superfície L quanto O que o tamanho das lesões no tempo 16h (16L: 160,5?m; 16O:123,8?m) foram significativamente maiores que o tempo 10h (10L:97,6?m; 10O:115,4?m). Dessa forma, a imersão na solução desmineralizadora, independente do tempo 10 h ou 16 h, formou lesão de cárie subsuperficial em ambas as superfícies L e O. Estes resultados sugerem que o método adotado de indução química de lesão de cárie pode ser utilizado tanto em superfície lisa como em superfície oclusal nos estudos in vitro, independente do tempo 10 h ou 16 h.Although preventive dentistry has constantly improved, dental caries is still highly prevalent in general population, whereas the occlusal surface is found to be the most susceptible to the onset of subsurface lesion, due to both morphologic and structural characteristics that can keep the dental biofilm undisturbed. However, most of the in-vitro studies on incipient caries induction is conducted on free surfaces of the tooth; scarce are the studies carried out on the occlusal surface. Thus, the objective of the present study was to assess quantitatively, by transversal microhardness (MH), as well as qualitative and quality quantitatively, by polarized light microscopy (PL), the effect of the immersion time (10h and 16h) on hydroxyapatite subsaturated demineralizing solution in order to produce subsurface artificial caries lesion in enamel (SACLE) on smooth and occlusal surfaces of third molar teeth. Human freshly extracted third molar teeth were cleaned and sectioned. It was possible to obtain two smooth (S) and one occlusal (O) fragments from each tooth. To standardize the teeth to be submitted to cariogenic challenge the block as flat smooth surface was submitted to microhardness analysis, the teeth selected were those with hardness around the average with a variation of plus or minus 10%. Of these 45 blocks and 45 of the smooth surface of the occlusal surface of the same tooth were randomly selected the fragments were covered with acid-resistant varnish except for an exposed area of 4 x 4 mm of enamel, being then randomly divided into three groups (n=15) for each substrate Smooth - S - [Control (CoS), 10 h (10S) and 16 h (16S)] and occlusal - O [Control (CoO), 10 h (10O) and 16 h (16O)] . Specimens were later immersed into the demineralizing for the specific period of each group, rinsed and sectioned in two parts through the long axis of the exposed area. Each part of a fragment was embedded into acrylic resin, polished and assessed by means of MH and PL. In order to carry out MH assessment, ten indentations were made in different depths: 10, 20, 30, 40, 50, 70, 90, 110, 140, 170 ?m at 3 different points, where the averages in each depth was obtained. For the PL assessment, the depths of the lesions were measured at 3 different distances, obtaining thus the averages. A multivariate assessment for mixed model was carried out at three criteria for MH and two criteria for the PL measurements. Multiple comparisons were submitted to Tukey test (p<0.05). Results showed that there was a significant interaction between the factors group and depth (p