Antiiulcerogenic gastric and anti-inflammatory intestinal activities of Albarema cochliacarpos

Abarema cochliacarpos (Gomes) Barneby & Grimes, pertencente à família Mimosaceae, é conhecida popularmente como barbatimão por comunidades tradicionais do Nordeste do Brasil, que utilizam sua casca no tratamento da úlcera gástrica e inflamação, entre outros usos. Neste trabalho, inicialmente realizou-se a triagem da atividade antiulcerogênica de extratos e frações, utilizando-se o modelo de úlcera gástrica induzida por etanol absoluto em ratos. A fração butanólica do extrato metanolico, na dose de 150mg/kg, foi selecionada por ser a mais efetiva, a qual foi utilizada para o estudo dos mecanismos de ação antiulcerogênico em modelos de muco aderido e ligadura do piloro. Essa fração foi testada em modelo de atividade antiinflamatória intestinal em ratos. A toxicidade aguda de AC foi avaliada em camundongos Swiss (na dose de 5000 mg/kg) não tendo sido observados sintomas ou sinais de toxicidade. AC 150mg/kg foi sempre administrada oralmente aos animais, exceto no modelo de ligadura do piloro, no qual a via intraduodenal foi empregada. A fração foi capaz de aumentar significativamente o muco aderido, e alterar parâmetros bioquímicos da secreção ácida gástrica, produzindo redução do volume gástrico e aumento do pH, o que sugeriu possível atividade anti-secretória e citoprotetora. AC 150mg/kg, também apresentou atividade cicatrizante sobre lesões gástricas produzidas no modelo crônico de úlcera gástrica induzida por ácido acético a 30%, o que foi evidenciado pela redução da área de lesão, e confirmado na análise histológica das lesões. Indução da proliferação celular foi indicada pelos resultados de proliferating cell nuclear antigen (PCNA). A imunolocalização de heat shockprotein (HSP-70), cicloxigenase-2 (COX- 2) e vascular endothelial growth factor (VEGF) no tecido gástrico sugeriu que a atividade de cicatrização da úlcera foi induzida por aumentos da expressão destes fatores, e da produção de muco, esta última evidenciada pelos resultados do PAS. No modelo de colite ulcerativa aguda induzida por ácido trinitrobenzenosulfônico-TNBS (lOmg/animal), AC 100 e 150 mg/kg foram capazes de diminuir significativamente a área de lesão e os níveis de mieloperoxidase (MPO) na mucosa cólica. Porém, apenas AC 150 mg/kg diminuiu os níveis do fator de necrose tumoral alfa (TNF-a ). A análise por western blot mostrou que AC 150 mg/kg induziu down-regulation da expressão de COX-2 e da enzima óxido nítrico sintase induzida (i-NOS), bem como demonstrou a redução da ativação de c-Jun N-terminal kinase (JNK). No modelo de colite crônica (TNBS, 30mg/animal) AC 150 mg/kg demonstrou um perfil semelhante, ou seja, inibição dos parâmetros inflamatórios do processo; porém, apenas neste modelo um aumento da produção da citocina antiinflamatória IL-10 foi evidenciada. Estes dados sugeriram um efeito protetor significativo da fração butanolica na fase crônica da resposta inflamatória associada à colite induzida por TNBS. O estudo fitoquímico de AC por espectrometria de massas (ESI/MS) e ressonância magnética nuclear (RMN) identificou catequinas como componente majoritário, sendo os taninos da classe das proantocianidinas. Tomados em conjunto, estes dados permitem concluir que AC150 de Abarema cochliacarpos possui compostos químicos com atividades antiulcerogênica gástrica e antiinflamatória intestinal, as quais podem ser atribuídas aos taninos e (+)-catequinas presentes nesta fração.Abarema cochliacarpos (Gomes) Barneby & Grimes, which belongs the Mimosaceae family, is popularly known as "barbatimao" by the tradicional communities in Northeastern Brazil that use its bark in the treatment of gastric ulcer and inflammation, among other uses. In this work, the antiulcerogenic activity of its extracts and fractions was screened, using the gastric ulcer model induced by absolute ethanol in rats and selecting of the butanolic fraction of the methanolic extracts at dosis of 150 mg/kg as being in the most effective one. The action mechanisms of this fraction were studied based on the mucus gastric content and gastric secretion models. We have also decided to test it in anti-inflammatory intestinal activity model. Acute toxicity of AC150 was evaluated in Swiss mice, and no symptoms or visible toxicity signs were observed. Wistar rats were used in the others experiments. The intraduodenal pathway was utilized only in the pylorus ligature model; in the other models the oral pathway was employed. The AC 150 was able to significantly increased the mucus production, as well as to change the biochemical parameters of the acid gastric secretion, reducing the gastric volume and increasing the pH, suggesting a cytoprotection and anti-secretory activity. AC150 showed healing activity in the chronic model of gastric ulcer induced by 30 % acetic acid. This was demonstrated by the reduction of lesion area, in agreement with HE histological analysis. The induction of cellular proliferation was indicated by the PCNA results. The immunolocation of HSP-70, COX-2 and VEGF in the gastric tissue suggested that the ulcer cicatrization activity was induced by the increased of the expression of these factors, as well as the increase of the mucus production highlightened in the PAS results. In the acute ulcerative colitis model induced by intra-colonic administration of trinitrobenzensulfonic acid (TNBS) (10 mg/animal) AC 100 and 150 mg/kg were able to significantly decrease the lesion and the mieloperoxidase (MPO) levels in the colonic mucosa. However, only AC150 decreased the levels of the tumour necrosis factor-alpha (TNF-a). The western blot analysis showed that AC 150 mg/kg induced the down-regulation of both cyclooxygenase (COX)-2 and inducible nitric oxide synthase (iNOS) expression, and the involvement of signaling also demonstrated a reduction in the JNK activation in this dosis. In the chronic colitis model (TNBS, 30 mg/animal) AC 150 showed the same inhibition profile of the inflammatory parameters; nevertheless, the increase of the antiinflammatory cytokine production IL-10 was highlightened only in this model. These data suggested a significant protective effect of the chronic administration of AC during the chronic phase of the inflammatory response associated with TNBS induced colitis. Phytochemical studies by mass spectrometry (MS) and nuclear magnetic resonance spectroscopy (NMR) revealed that catechins were a major component into condensate class of tannins. Taken as a whole, these data allow us to conclude that the AC150 of Abarema cochliacarpos has chemical compounds that present antiulcerogenic gastric and anti-inflammatory activities, which may be attributed to the tannins and (+)-catechins of this fraction