Mutations analysis of the IRF6 gene in Van Der Woude syndrome and of the V274I polymorphism (IRF6) in nonsyndromic cleft lip and/or palate

Mutações no gene do fator regulador de interferon 6 (IRF6) têm sido identificadas em afetados pela síndrome de van der Woude (SVW) e polimorfismos em IRF6 foram associados a pacientes com fissura labial e/ou palatina não-sindrômica (FL/PNS). A síndrome de van der Woude (SVW) é uma alteração craniofacial rara, autossômica dominante, caracterizada pela associação de fossetas em lábio inferior e fissura lábio-palatina (FL/P). A presença das fossetas labiais representa a manifestação clínica que distingue a SVW das FL/PNS. O objetivo deste estudo foi identificar mutações no gene IRF6 em membros de duas famílias brasileiras afetadas pela SVW e avaliar a freqüência do polimorfismo V274I (rs2235371) em indivíduos com FL/PNS. Membros das duas famílias, afetados e não afetados, foram analisados por seqüenciamento das regiões exônicas do gene IRF6 e as mutações foram confirmadas por digestão com enzima de restrição. O polimorfismo V274I em IRF6 foi analisado por PCR-RFLP (reação em cadeia da polimerase em associação com polimorfismo de comprimento de fragmento de restrição enzimática) em 241 pacientes com FL/PNS e em 126 indivíduos normais, utilizados como controle. Duas novas mutações foram identificadas nas famílias com SVW: uma mutação com alteração na matriz de leitura, resultante de uma deleção do nucleotídeo G na posição 520 de IRF6 (520delG) e uma mutação por substituição, resultante de uma troca de nucleotídeo T por A na posição 1135 do exon 8 (T1135A) de IRF6. As mutações foram ausentes em todos os indivíduos normais e nos pacientes com FL/PNS, confirmando assim, suas especificidades. Nas famílias afetadas. A presença do polimorfismo V274I foi identificada em 9,5% dos indivíduos do grupo de FL/PNS e em 10,3% dos voluntários do grupo controle. Os resultados deste estudo demonstram que mutações no gene IRF6 estão relacionadas com a etiologia da SVW, mas a presença do polimorfismo V274I não é um fator etiológico isolado para o desenvolvimento de FL/PNSMutations in the interferon regulatory factor 6 (IRF6) gene have been identified in the patients with van der Woude syndrome (VWS) and polymorphisms at the IRF6 are associated with nonsyndromic cleft lip and/or palate (NSCL/P). VWS is a rare autosomal dominant craniofacial disorder characterized by lower lip pits and cleft lip and/or palate. The presence of the lip pits in the lower lip is the only clinical features distinguishing VWS from NSCL/P. The aim of this study was identified IRF6 mutations in the members of the 2 Brazilian families affected by VWS and to evaluate the frequency of the V274I polymorphism (rs2235371) in patients with NSCL/P. Members of the both families, affected and unaffected, were analyzed for sequencing of the IRF6-exonic region, and the mutations were confirmed by restriction enzyme digestion. The IRF6 V274I polymorphism was analyzed by PCR-RFLP (Restriction Fragment Length Polymorphism-Polimerase Chain Reaction) in 241 patients with NSCL/P and in 126 control individuals. Two novel heterozygous mutations were identified in the families with VWS: a mutation with alteration in the codon-reading, resulting from a deletion of G at the nucleotide position 520 in the exon 6 (520delG), and a substitution mutation, resulting from a change of the single nucleotide T to A at position 1135 in exon 8 (T1135A) of the IRF6. The mutations were absent in all healthy individuals and in all patients with NSCL/P, thus confirming their specificities. The presence of the V274I polymorphism was identified in 9.5% of the NSFL/P group and in 10.3% of the control group. The results of this study show that IRF6 mutations are released with the SVW etiology, but the presence of the V274I polymorphism is not an isolated etiologic factor for development of the NSFL/