Effects of doxazosin, or their combination ont th parenquimal-stromal interaction in the rat prostate : cellular proliferation and death, MMP-2 and 9 activity and TIMPs-1 and 2 gene expression

Finasterida (Fin), um inibidor da enzima 5a-redutase do tipo II e a Doxazosina (Dox), um inibidor do receptor a1-adrenérgico, tem sido amplamente utilizados no tratamento dos sintomas da Hiperplasia Prostática Benigna (HPB). Recentemente, dados clínicos demonstraram que a combinação destas drogas foi mais efetiva em prevenir o desenvolvimento de retenção urinária aguda. Além disso, tem sido demonstrado que tanto as drogas isoladas, como em associação também podem ser utilizadas na prevenção e tratamento do câncer de próstata, devido ao seu potencial de induzir apoptose em células epiteliais normais e tumorais. Apesar disso, pouco se conhece sobre os efeitos da Fin e da Dox administradas isoladas ou em associação sobre a morfofisiologia prostática, incluindo proliferação, morte celular, e indução de remodelação da matriz extracelular pelas metaloproteinases de matriz. Ratos wistar machos adultos (13 semanas) foram tratados com Dox (25mg/kg/dia) ou com a combinação de Fin+Dox (25mg/kg/dia). Após a eutanásia, os lobos prostáticos (ventral, dorsolateral e anterior) foram retirados, pesados e imersos em fixador para análises morfológicas ou congelados em nitrogênio líquido para posterior análises bioquímicas. Os resultados morfológicos e estereológicos demonstraram que o tratamento com a Dox isoladamente por 3 dias resultou em aumento do peso da próstata ventral, com acúmulo de secreção na luz glandular. Os pesos absoluto e relativo das próstatas dorsolateral e anterior não sofreram alteração neste período de tratamento. Entretanto, após 30 dias de tratamento, observou-se uma redução de aproximadamente 20% nos pesos absoluto e relativo de todos os lobos prostáticos e um aumento do volume glandular ocupado pelo colágeno no estroma nos três lobos prostáticos. O tratamento com doxazosina também reduziu o índice de proliferação celular e aumentou o índice apoptótico em todos os períodos analisados. A próstata ventral de ratos tratados com a combinação de Fin+Dox apresentou perda de peso após 30 dias de tratamento. Nos dois períodos de tratamento ocorreu diminuição do índice de proliferação celular, aumento de apoptose e do volume estromal de colágeno, mais evidentes quando comparados ao tratamento com as drogas isoladas. O tratamento combinado também provocou aumento da imunomarcação para o TGF-ß1 demonstrado por imunohistoquímica, principalmente no epitélio. A expressão dos RNAms para MMP-2, TIMPs-1 and - 2 dimunuiu após 30 dias de tratamento, enquanto o RNAm para a MMP-9 não foi detectado em nenhum grupo experimental. O tratamento com Fin+Dox por 30 dias promoveu uma diminuição na atividade gelatinolítica da MMP-2 e um aumento na atividade da MMP-9. Em conjunto, os resultados deste estudo demonstram que tanto o tratamento com doxazosina quanto o tratamento combinado de Fin+Dox induzem grandes alterações glandulares que levam a atrofia prostática, sendo ainda mais significativa com o tratamento combinado, possivelmente pela ação complementar destas duas drogas sobre o parênquima e o estroma glandulares. Nesta atrofia, a MMP-9 e o TGF-ß 1parecem desempenhar um papel importante. Desta forma, nossos resultados auxiliam o entendimento dos dados clínicos, demonstrando que a combinação dos dois fármacos pode ser mais eficaz no tratamento da HPB.Finasteride (Fin), an inhibitor of type II 5-a reductase, and Doxazosin (Dox), an a1- adrenergic blocker, have been widely used in treatment of Benign Prostate Hyperplasia (BPH) symptoms. Recently, clinical data have demonstrated that the combined therapy with Fin+Dox reduced the long-term risk of acute urinary retention and the need for invasive therapies than either drug alone. Moreover, both drugs, alone or in combination have been suggested to be effective in the treatment of prostate cancer by inducing apoptosis in normal and tumoral cells. However, little is known about the effects of these drugs administrated alone or their combination on prostate tissue morphohysiology, including prostate morphology, cell proliferation, apoptosis and matrix metalloproteinases activities. Male adult Wistar rats (13 weeks old) were treated with doxazosin (25mg/kg/day) or with finasteride (25mg/kg/day) or with the combination of both drugs. The ventral (VP), dorsolateral (DLP) and anterior prostate (AP) were excised and processed for histochemical, morphometric and biochemical analysis. The results of morphological and stereological analyses demonstrate that Dox treatment for 3 day resulted in an increased in ventral prostate absolute and relative weight with secretion accumulation. The weight of dorsolateral and anterior prostate did not change in this period of treatment. However, after 30 days, the prostate exhibited an absolute and relative weight reduction of about 20% and an increase in collagen volume fraction in the stromal space in the three prostatic lobes. Dox also reduced epithelial cell proliferation and increased apoptosis in the three prostatic lobes in all periods of tretament. Rat VP treated with Fin+Dox also presented a reduction in absolute and relative weight, decrease in epithelial cell proliferation, increase in apoptosis and collagen volume fraction in the stroma in all periods analyzed, more than Dox alone. Fin+Dox treatment also increased the TGF-ß 1 immunoreaction in the epithelium and in the stroma of VP. The mRNA for MMP-2, TIMPs-1 and - 2 expression after 30 days of treatment were decreased. The mRNA for MMP-9 was not detected in any groups analyzed. Fin+Dox treatment for 30 days promoted a decrease in gelatinolitic activity of MMP-2 and an increase in MMP-9. Take together, these results demonstrated that both Dox alone or in combination with Fin induced changes in glandular histoarchitecture, leading to a prostate atrophy, being the combined treatment more effective in inducing glandular atrophy, possibly to the complementary action of the Fin and Dox on prostate parenchyma and stroma, respectively. In this process, the MMP-9 and TGF-ß1 appear to participate effectively. Our results contribute to a better understanding of the clinical data, demonstrating that the combined treatment can be more effective in the BPH treatment