Evaluation of relative bioavailability from two levocetirizine formulations in healthy volunteers

Objetivo: Desenvolver e validar um método analítico para quantificação de levocetirizina em plasma humano. Além disso, a biodisponibilidade relativa de uma formulação contendo 5 mg de dicloridrato de levocetirizina (formulação teste e formulação referência produzida por Farmalab Indústrias Químicas e Farmacêuticas Ltda.) foi avaliada em trinta e seis voluntários sadios de ambos os sexos. Método: O plano de estudo utilizado foi aberto, randomizado, cruzado com um intervalo de washout de 7 dias. As amostras de plasma foram obtidas por um período de 48 horas. As concentrações plasmáticas de levocetirizina foram analisadas por cromatografia líquida de alta eficiência acoplada à espectrometria de massas (HPLC-MS/MS), com modo de ionização electrospray positivo usando um monitoramento de reação simples (SRM). O método analítico foi validado considerando os seguintes parâmetros: especificidade, linearidade, precisão, exatidão, recuperação e estabilidades de acordo com a RE n°899/03 (ANVISA). Das curvas de concentração plasmática versus o tempo para levocetirizina, os seguintes parâmetros farmacocinéticos foram obtidos: ASC0-48h, ASC0-inf e Cmax. Resultados: A curva de calibração foi linear de 0,5 a 500,0 ng/mL. O método obteve uma corrida cromatográfica de 2,0 minutos usando uma coluna POLARIS C18 (3 µm, 50 mm x 2,0 mm). A precisão inter-corrida dos controles de qualidade foi 4,76% (CQB 1,5 ng/mL), 7,14% (CQM 200,0 ng/mL) e 3,78% (CQA 400,0 ng/mL). A exatidão inter-corrida dos controles de qualidade acima mencionados foi de 98,00%, 99.63% e 97,84%, respectivamente. A razão das médias geométricas dos dois medicamentos (teste e referência) e o intervalo de confiança (IC) foram respectivamente: 101,11% (90% IC= 97,42% - 104,93%) para ASC0-48h, 101,17% (90% IC= 97,49% - 104,99%) para ASC0-inf, 99,43% (90% IC= 94,29% - 104,86%) para Cmax. Conclusão: O método analítico mostrou-se preciso, exato e rápido para quantificação de levocetirizina em plasma humano. Desde que os IC 90% para ASC0-48h, ASC0-inf e Cmax apresentaram-se dentro do intervalo de 80-125% proposto pela ANVISA, foi concluído que a formulação teste Levocetirizina 5 mg é bioequivalente a formulação Zyxem® fabricada pelo laboratório Farmalab Indústrias Químicas e Farmacêuticas LtdaObjective: To develop and validate an analytical method for levocetirizina quantification in human plasma. Moreover, it was evaluated the relative bioavailability of a levocetirizine dichloridrate 5 mg tablet formulation (test formulation vs reference formulation from Farmalab Ltda.) in 36 healthy volunteers of both sexes. Methods: The study was conducted using an open, randomized, two-period crossover design with 7 days washout period between doses. Plasma samples were obtained over a 48 h period. Plasma levocetirizine concentrations were analyzed by liquid chromatography coupled to tandem mass spectrometry (HPLC-MS/MS) with positive ion electrospray ionization using single reaction monitoring (SRM). The analytical method was validated considering specificity, linearity, precision, accuracy, recovery and stabilities parameters according to RE n°899/03 (ANVISA). From the levocetirizine plasma concentration vs time curves, the following pharmacokinetic parameters were obtained: AUC0-48h, AUC0-inf e Cmax. Results: The calibration curve was linear over de range from 0,5 to 500,0 ng/mL. The method chromatographic run was 2,0 minutes using a POLARIS C18 column (3 µm, 50 mm x 2,0 mm). The between-run precision of quality controls was 4,76% (CQB 1,5 ng/mL), 7,14% (CQM 200,0 ng/mL) e 3,78% (CQA 400,0 ng/mL). The between-run accuracy for the above mentioned quality controls was 98,00%, 99.63% e 97,84% respectively.The limit of quantification was 0.5 ng/mL. The geometric mean ratio of both formulations (test and reference) and respective 90% confidence interval (CI) were: 101,11% (90% CI= 97,42% - 104,93%) for AUC0-48h, 101,17% (90% CI= 97,49% - 104,99%) for AUC0-inf, 99,43% (90% CI= 94,29% - 104,86%) for Cmax. Conclusion: The analytical method has proven to be precise, accurate and fast to levocetirizina quantification in human plasma. Since the 90% CI for AUC0-48h, AUC0-inf and Cmax ratios were within the 80-125% interval proposed by the ANVISA, it was concluded that levocetirizine formulation elaborated by Eurofarma Laboratórios Ltda. is bioquivalent to Zyxem® formulatio