Serological tests to American cutaneous leishmaniasis applied on screened samples for Chagas disease in areas of the State of São Paulo, Brazil

As zonas endêmicas de leishmanioses e doença de Chagas, duas grandes endemias causadas por cinetoplastídeos, sobrepõe-se na América do Sul, especialmente na região Sudeste do Brasil, o que pode gerar casos de co-infecção entre Leishmania spp. e Trypanosoma cruzi. Ocorrem reações cruzadas, mesmo com baixos títulos, em inquéritos sorológicos de pacientes infectados com os parasitas, o que leva a falsas estimativas de prevalência de ambas as infecções. Este trabalho tem o objetivo de observar o efeito de um diluente de amostra proposto para reduzir a ocorrência de reações cruzadas em testes sorológicos para doenças causadas por cinetoplastídeos e outros parasitas. Foram selecionadas 585 amostras de sangue provenientes de quatro regiões do Estado de São Paulo, entre litoral e planalto, colhidas no período compreendido entre 1996 a 2003, durante atividades do Programa de Controle da Doença de Chagas. As análises das amostras foram feitas através das Reações de Imunofluorescência (RIFI) e do ensaio imunoenzimático (ELISA). Com as amostras reagentes (onze no total), para doença de Chagas e leishmaniose em ambas as técnicas, foi realizado o teste ELISA alta avidez, que utiliza um diluente com caotrópico, que demonstrou redução nos títulos da reação positiva falsa, restando apenas uma amostra sem redução significativa do seu título, que sugeriu ser um caso de co-infecção de doença de Chagas e leishmaniose, epidemiologicamente factível dada a existência de ambas as infecções na área estudada. O uso deste diluente em estudos clínicos e epidemiológicos pode aprimorar o diagnóstico para a identificação de soropositivos em regiões de sobreposição de endemias causadas por cinetoplastídeos.Leishmaniases and Chagas disease are endemic in extensive areas of the American Continent. These parasitic diseases can occur together in South America, particularly in southwestern regions of Brazil, which poses a serious epidemiological problem due to the observed serological cross-reactivity between Leishmania spp. and Trypanosoma cruzi, even at low titers. As false prevalence estimates of these agents are critically misleading, we designed an experiment aiming at analyzing the effect of a diluent intended to reduce the chances of false positive tests resulting from serological cross-reactivity between these kinetoplastids and other parasites. As a part of the activities of the Program for the Control of Chagas disease, we selected 585 blood samples collected, during the period from 1996 to 2003, from residents in four regions situated between the seacoast and the plateau of the State of São Paulo. The serological tests used (IFAT and ELISA) produced a total of eleven positive reactions. Lower false positive titers resulted from the use of high avidity ELISA plus a chaotropic diluent. The only serological result in which titers corresponding to both infections were not significantly reduced was suggestive of mixed infection, on the basis of the fact that it was connected to a patient evidently exposed to both agents. This experiment suggests that the use of a chaotropic diluent can be a useful tool to reduce the proportion of such false parasitic mixed infection results as those investigated by us