Efeito de lasalocid-A sobre o fluxo de Ca2+ mitocondrial

Em trabalho anterior,PEREIRA DA SILVA et alii (1984), apresentaram evidências de que lasalocid-A, em concentrações bastante abaixo da necessária para agir como ionóforo de Ca, inibe o efluxo do mesmo em mitocôndrias de fígado. No presente trabalho, estudamos o mecanismo desta inibição em mitocôndrias de fígado e de coração. Primeiramente, observamos que lasalocid-A, na faixa de concentração usada nestes experimentos (0-250 nM), promove a troca eletroneutra de K+ por H+ através da membrana interna mitocondrial e como conseqüência pode causar alterações importantes nos valores de ?delta? pH e à?delta?U (os componentes químico e elétrico do potencial eletroquímico de prótons (?delta? ?mu? H+). O efeito indireto destas alterações na inibição da liberação de Ca2+ mitocondrial foi descartado pelos nossos experimentos nos quais são mostrados três padrões do efeito de lasalocid-A, dependendo do carregamento de Ca mitocondrial. Em baixo, carregamento de Ca (5-70 nmol de Ca /mg de proteína), sob condições experimentais nas quais a liberação de Ca é supostamente mediada por um antiporter Ca2+ /2H+, os dados cinéticos,indicam que lasalocid-Ainibe o efluxo do cátion por um mecanismo competitivo. A troca Ca /2Na , a via dominante para o efluxo de Ca2+ em mitocôndrias de coração, por lasalocid-A. Em carregamento intermediário de CA2+ . nmol de Ca /mg de proteína), lasalocid-A estimula levemente liberação de Ca2+. Este efeito parece estar relacionado a não foi afetada 2+ de Ca (70-110 a um aumento da permeabilidade da membrana causada pelo deslocamento de uma quantidade determinada de Mg estrutural ligado à membrana. Finalmente, em alto carregamento de Ca (110-140 2+ nmol de Ca rng de proteína ) , lasalocid-A aumentou a habilidade 60 de retenção de Ca2+ pela mitocôndria, mesmo na presença de agentes liberadores de Ca , tais como fosfato e agentes oxidantes de nucleotídeos de piridina mitocondriais. A manutenção de valores altos de potencial de membrana nestas condições, podem sugerir que lasalocid-A é um potente inibidor da abertura de "poros" induzidos na membrana pelo cátion.... Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digitalA previous communication (PEREIRA DA SILVA et alii, 1984) presented evidence that lasalocid-A, at concentrations far below those required to act as Ca2+ ionophore, significantly inhibited Ca2+ efflux from liver mitochondria. In the present work we have studied the mechanism of this inhibition in liver and heart mitocondria. Firstly it was observed that lasalocid-A, in the range of concentration used in these experiments (0-250nM), promotes the electroneutral exchange of K+ for H+ across the inner mitochondrial membrane and as a consequence can cause important alterations in the values for ?delta?PH and ?delta? U (chemical and electrical components, respectively, of the electrochemical membrane potential (?delta? UH+). The indirect effect of those alterations in the inhibition of mitochondrial Ca2+ release eas ruled out by our experiments which have shown three patters of lasalocid-A effect, depending on the size of the mitochondrial Ca2+ load. ... Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertation