Aspectos bioquimicos e morfologicos da matriz extracelular das cartilagens septal e alares do nariz suino

Este trabalho teve por objetivo caracterizar alguns aspectos dos componentes da matriz extracelular de duas cartilagens do nariz suíno, as alares e a septal, além disso caracterizar a organização histológica e alguns aspectos histoquímicos. Para extração de componentes da matriz foi utilizado o agente caotrópico Gu-HCl. O glicosaminoglicano predominante para as duas cartilagens é o condroitim sulfato. Após ultracentrifugação dos extratos a tração D4 das duas cartilagens foi tracionada em DEAE-Sephacel usando gradiente de NaCl. A análise em SDS-P AGE, para as duas cartilagens mostrou semelhanças com a presença de fibromodulim, decorim e proteínas de ligação. Somente a cartilagem septal apresentou o componente de 115 kDa que possivelmente aparece como subunidades de 30 kDa após a ação de agente redutor. Para a determinação das populações de glicosaminoglicanos foi utilizado tracionamento com Sephadex G-75, seguida de análise em P AGE-Barbital. As duas cartilagens apresentaram uma população fortemente polidispersa. As populações de proteoglicanos foram analisadas após tracionamento em Sepharose CL-6B seguida de análise das amostras em gel agarose­poliacrilamida. As duas cartilagens apresentam uma população fortemente polidispersa, sendo que a septal é menos uniformemente poli dispersa que a alar. O tracionamento de AD2 em DEAE-Sephacel, e a análise em SDS-P AGE e agarose-poliacrilamida, mostraram a presença dos pequenos proteoglicanos biglicam e decorim provavelmente associados aos grandes proteoglicanos. A cartilagem septal apresenta os condrócitos grosseiramente entileirados acompanhando o eixo maior da cartilagem, enquanto em alar os condrocitos estão dispostos caracteristicamente em grupos isógenos. Para a histoquímica utilizou-se Xylidine Ponceau para proteínas totais, Picrosirius-Hematoxilina para colágeno, Azul de Toluidina para glicosaminoglicanos totais e Azul de Alcian em pH 2,5 e 1,0 para glicosaminoglicanos sulfatados e carboxilados. Os glicosaminoglicanos totais estão mais evidenciados na matriz territorial ao passo que as proteínas totais são mais evidenciadas na matriz interterritorial. O colágeno em cartilagem septal está grosseiramente organizado acompanhando o eixo longitudinal da peça entre as fileiras de condrócitosThe objective of the present study was to characterize some aspects of the extracellular matrix components of the alar and septal cartilage of the nose of swine and to examine the histological and histochemical aspects of the two types of cartilage. The kaotropic agent Ou-HCI was used to extract the matrix components. The predominant glycosaminoglycan in the two cartilages was chondroitin sulfate. After ultracentrifugation, the D4 iTaction of the septal and alar cartilages was iTactioned on DEAE-Sephacel using na NaCI gradient. SDS-P AGE analysiys showed similarities between the two cartilages, with the presence of fibromodulin, decorin and binding proteins. Only the septal cartilage presented the 115 kDa component, which possibly appears as 30 kDa subunits after the action of the reducing agent. The glycosaminoglycan populations were determined by iTactionation on Sepharose CL-6B followed by analysis of the samples on the agarose­polyacrilamide gel. The two cartilages presented a strongly polydispersed population, which was less uniformly polydispersed in the septal than in the alar cartilage. AD2 iTactionation on DEAE-Sephacel and sample analysis by SDS-P AGE and agarose­polyacrylamide electrophoresis showed the presence of the small proteog1ycans biglycan and decorin, possible associated with the large proteoglycans. The septal cartilage presents chondrocytes rough1y arranged in rows accompanyng the widest axis of the cartilage, whereas the alar cartilage presents chondrocytes characteristically arranged in isogenic groups. Histhochemistry was performed usisng Xylidine Ponceau for total proteins, Picrosirius-Hematoxylin for collagen, Toluidine Blue for total glycosaminoglycans. And alcian blues, pH 2.5 and pH 1.0, for sulfated and carboxylated glycosaminoglycans. Total glycosaminoglycans are more c1eary visible in the territorial matrix, whereas total proteins are more cleary visible in the interterritorial matrix. The collagen of the septal cartilage is rough1y organized along the longitudinal axis of the specimens between the chondrocytes row