Dinitrato de isossorbida contribui para a regeneração muscular em modelo experimental da distrofia muscular de Duchenne

A distrofia muscular de Duchenne (DMD) é uma miopatia ligada ao cromossomo X, provocada pela ausência de distrofina, uma proteína da membrana da fibra muscular esquelética, cuja função está relacionada à manutenção da estab11idade do sarcolema. A ausência de distrofina, abera a integridade estrutural do sarcolema fazendo com que a fibra muscular sofra necrose e posterior regeneração. Com o surgimento de uma linhagem de camundongos mutantes (mdx) cujas fibras musculares à semelhança dos pacientes humanos são deficientes em distrofina, diversos trabalhos vêm sendo desenvolvidos com estes animais. Até o início da senilidade, os camundongos não apresentam fraqueza muscular e não vão a óbito. Outra diferença fenotipica fundamenta} entre a DMD humana e a dos camundongos é o fato de que, nestes últimos, as fibras musculares mantém a capacidade de regeneração. É certo que a ausência de distrofina seja a responsável direta pela necrose das fibras musculares, entretanto, é possível que a perda da capacidade regenerativa esteja relacionada a outros fatores. Um desses fatores, fundamental no presente trabalho, refere-se às células satélites das fibras musculares precursoras dos mioMastos e que originam novas fibras musculares. Estudos in vitro com células satélites de pacientes com DMD, demonstram que elas perdem, com o avançar da idade, a capacidade de se dividir. Dessa forma o presente traba1ho procura demonstrar experimenta1mente a capacidade regenerativa das fibras do músculo tibial anterior através de uma série de injeções de doridrato de lidocaína 2%. Os animaís de ambos os grupos (Grupo A - mdx; Grupo B -Black 10) foram submetidos a 20 e 55 aplicações de cloridrato de lidocaína, induzindo-se ciclos de degeneração e regeneração das fibras musculares. Os músculos coletados foram incluídos em historresina e corados pelos métodos da Hematoxilina-Eosina e Picrosirius-hematoxilina (para análise de tecido conjuntivo). Após a quantificação das populações das fibras musculares, os resu1tados mostraram que ao final 55 aplicações, a população de fibras regeneradas nos animais mdx sofreu uma redução de 48% em relação ao grupo controle, sendo que, ao final de 20 aplicações a redução da população de fibras foi de 0.2%. Não foi constatado o desenvolvimento de fibrose, o que exclui a tese sustentada por a1guns pesquisadores, de que este fator 100... seria o responsáve{ pe{a redução da capacidade regenerativa das fibras. De acordo com nossos resultados, podemos concluir que a redução da capacidade regenerativa das fibras está diretamente ligada a exaustão da capacidade miogênica das células satélites, não se encontrando qualquer evidência de que a redução desta atividade esteja associada ao aparecimento de fibrose intersticialThe Duchenne (Dl D) muscular dystrophy is a myopathy chromosome X-linked caused by the absence of dystrophyn, a protein of the skeletical muscular fiber' s membrane, whose function is re1ated to the sarcolemma' s stabi}jty. The absence Df dystrophyn, a1ters the sarcolemma' s structural integrity causing the muscular fiber to suffer necrosis and later regeneration. The regenerative capacity, however, markedly declines as ITom 3 years of age, when the necrotic fibers start to be replaced by adipose-fibre tissues. With the appearance of a line of mutant mice (mdx) whose muscular fibers in semblance with human patients are dystrophyn deficient, various studies are being deveJoped with these animais. Up to the beginning of seniJity, the mlce dld not show muscular weakness and did not die. Another fundamental phenotypical difference between a human DMD and the mice is the fact that, in the 1atter, muscu1ar fibers maintain regeneration capacity. lt is true that the absence of dystrophyn is directly responsible for the muscular fiber necrosis, however, it is possibte that the {oss of regenerative capacity can be re{ated to other factors. One of these factors refers to the satellíte ceHs of the muscular fibers forerunners to the myobtasts and which origina te new muscular fibers. In vitro studies of sateUite ceUs ftom DJ D parients, shows that they Jose, as age lncreases, the capac1ty for reproducrion Therefore, th1s work endeavours to demonstra te experimentally the regenerative capacity of the tibiai fore muscle fibers through a series ofinjections of2% lidocaine hydrochloride. The animals ofboth groups (Group A mdx; Group B -Black 10) were subrnitted to 20 and 55 adrninistrations of lidocaine hydrodoridre, inducing cydes of degeneration and regeneration of the musde fibers. The coHected muscles were included in hystoresin and stained using Haematoxi1yn and Eosin and Picrosirius haematoxHyn methods (for conective tissue analysis). Afier quantification the musde fibers popularion , results showed that at the end of the 55 adnllnistrations, the regenerative fibers population in mdx animais dropped 48% when compared to the control group, and that, at the end of 20 administrations the fibers population dropped 0.2%. The developement of fibrosis was not noted, wmch excludes the thesis suported by some researchers, that tms factor would responsible for the reduction Df the regenerative capacity Df the fibers. According to our resuhs, we can conclude that the fibers reduction of regenerating capacity is directiy linked to the sateUite cells exhaustion of the myogenic capacity, not having found any evidence that the reduction of tms actívity ís assocíated of ínterstitíal fibrosí