Produção e caracterização de microparticulas de alginato incorporando Aeromonas Hydrophila inativada para imunização de tilapia do nilo por via oral

A vacinação de peixes por via oral é considerada como uma alternativa relevante de imunização destes animais, visto que elimina o estresse associado com a vacinação via rota parenteral, possibilita a rápida vacinação de um grande número de peixes a custos reduzidos. Entretanto, esta técnica é apenas parcialmente efetiva devido à parcial destruição da vacina no sistema digestivo dos animais e a possíveis interações desta com componentes da ração. Este trabalho abordou a preparação e Cat11cterização de microesferas de alginato incorporando células inativadas de Aeromonas hydrophila, visando a imunização por via oral de peixes do tipo tilápia do Nilo, com cultivo de importância econômica considerável no Brasil, contra esta bactéria, comum na piscicultura de alta densidade animal. O uso de matérias primas de baixo custo e metodologias de preparação passíveis de utilização em escala industrial foi enfocado. Paralelamente aos estudos com Aeromonas hydrophila, efetuou-se estudos comparativos de incorporação de albumina de soro bovino (BSA), como antígeno modelo, nas partículas. As microesferas foram preparadas por emulsão com óleos vegetais, avaliando-se a influência das concentrações de alginato, agente ativo e tenso ativo (Span@ 80), da taxa de agitação e da proporção entre as fases nas características das partículas. Partículas esféricas com diâmetros médios de 55,3 Ilm a 143,0 Ilm contendo de 0,7 a 4,20 mg/mL de BSA foram obtidas, correspondendo a eficiências de incorporação da proteína de 72 a 84 % para BSA. Para as bactérias, a eficiência de incorporação atingiu 100 %, obtendo-se partículas de diâmetro de 39,2 a 82,0 /lm. Partículas contendo 14,22 mg de bactérias obtidas utilizando-se 1:9 (v/v) de fase aquosa (contendo 3,5% de alginato) em relação à fase oleosa (óleo de milho e Span@ 80 a 0,2%) agitadas a 2000 rprn apresentaramse estáveis em condições equivalentes às gastrintestinais por 12 horasThe oral vaccination of fishes has been considered a relevant altemative for the innnunization of these animals, since it eliminates the stress eaused by the immunologieal agent parenteral administration, added to the possibility of quickly vaccinating large numbers of animals ith reduced costs. The effectiveness of this approach is limited, however since the vaccine can be destroyed in the fish digestive system and interactions ith the feed components can oceUf. The purpose of tbis work was to produee and to characterize alginate microspheres with entrapped inactive Aeromonas hydrophila celIs for the oral immunization of Nile tilapia, against tbis bacteria, commonly found in high density fish production systems. The use of low cost raw materiaIs and of particle production methodologies easy to seale up were focused. Comparative studies with bovine serum albumin (BSA), as a mode! antigen, incorporated in the partic1es were also performed. The microspheres were prepared with vegetable oils emu1sion, and the infiuenee of alginate, aetive agent (BSA Of bacteria) and Span@ 80 surfactant concentration, stirring rate, and the. ratio between aqueous alginate and oi! phases on partic1e charaeteristics were evaluated. Spherical particles were obtained, with average diameters ranging trom 55.3 J.U11 to 143.0 J.L11l containing trom 0.70 to 4.20 rngImL of BSA, corresponding to incorporation efficieneies varying ITom 72 to 84%. For the baeteria, the incorporation efficiency reached 100 % and the particles obtained,,'presented mean diameters trom 39.2 to 82.0 _m. Microspheres containing 14.22 mg/rnL of cells prepared with 1:9 (v/v) of aqueous phase (containing alginate at 3.5% w/v) in relation to the oi! phase (com oi! containing 0.2 % Span@80) under mechanical stirring at 2,000 rpm remained stable in gastrointestinal conditions for 12 hour